| 嗜热菌Caldicellulosiruptor bescii Athe_0597基因克隆与表达 |
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| 引用本文： | 朱小燕,阿文静,嵇乐乐,罗丽琦,张贝贝,傅泽豪,方芳,范林林,李相前.嗜热菌Caldicellulosiruptor bescii Athe_0597基因克隆与表达[J].基因组学与应用生物学,2021,40(1):190-196. |
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| 作者姓名： | 朱小燕 阿文静 嵇乐乐 罗丽琦 张贝贝 傅泽豪 方芳 范林林 李相前 |
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| 作者单位： | 淮阴工学院生命科学与食品工程学院,淮安,223003;淮阴工学院,江苏省生物质转化与过程集成工程实验室,淮安,223003;淮阴工学院,江苏省益生制剂重点建设实验室,淮安,223003;淮阴工学院生命科学与食品工程学院,淮安,223003 |
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| 摘 要： | 嗜热菌Caldicellulosiruptor bescii能够高效水解木质纤维素,C.bescii分泌的纤维素降解体系中含有多种糖苷水解酶和未知功能的非催化蛋白.未知功能非催化蛋白Athe_0597能与多种纤维素底物结合且在纤维素降解体系中高丰度存在.本研究对Athe_0597进行了生物信息学分析;以C.bescii基因组为模板,利用PCR技术扩增Athe_0597基因;构建pCold Ⅰ-0597表达质粒并在Escherichia coli BL21(DE3)中表达,优化诱导表达条件.生物信息学分析显示,Athe_0597的前22个氨基酸为信号肽,去除信号肽后的蛋白理论分子质量为54.59 kD,等电点为9.27,亲水性系数和不稳定系数分别为-0.488和23.88,是亲水性稳定蛋白;成功克隆Athe-0597基因并在E.coli BL21(DE3)中成功表达;获得重组蛋白最佳诱导表达条件:诱导剂IPTG浓度为0.25 mmol/L,诱导时间4 h,诱导前菌体浓度OD600m为0.6,诱导温度30℃.本研究为Athe_0597在C.bescii高效水解纤维素中的功能研究提供了理论基础.
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| 关 键 词： | 嗜热厌氧菌(Caldicellulosiruptor bescii) Athe_0597 基因克隆 诱导表达 |
Cloning and Expression of Athe_0597 Gene from Caldicellulosiruptor bescii |
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| Zhu Xiaoyan,E Wenjing,Ji Lele,Luo Liqi,Zhang Beibei,Fu Zehao,Fang Fang,Fan Linlin,Li Xiangqian.Cloning and Expression of Athe_0597 Gene from Caldicellulosiruptor bescii[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(1):190-196. |
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| Authors: | Zhu Xiaoyan E Wenjing Ji Lele Luo Liqi Zhang Beibei Fu Zehao Fang Fang Fan Linlin Li Xiangqian |
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