| 狂犬病毒街毒株全长基因cDNA克隆的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 明平刚,黄莹,唐青,杜加亮,陶小燕,严家新,扈荣良. 狂犬病毒街毒株全长基因cDNA克隆的构建及鉴定[J]. 病毒学报, 2009, 25(1): 17-22 |
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| 作者姓名： | 明平刚 黄莹 唐青 杜加亮 陶小燕 严家新 扈荣良 |
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| 作者单位： | 病毒基因工程国家重点实验室,中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;武汉生物制品研究所,武汉,443006;病毒基因工程国家重点实验室,中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;军事医学科学院,军事兽医研究所,长春,130062;病毒基因工程国家重点实验室,中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;武汉生物制品研究所,武汉,443006;军事医学科学院,军事兽医研究所,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家863课题(2006AA02Z110,2007AA02Z402);;国家自然科学基金重大项目(30630049);;公益性行业科研专项(200803014) |
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| 摘 要： | 利用分子克隆的方法,将狂犬病毒街毒株的全基因组分为4个片段按照它们基因组上的顺序克隆到真核表达载体pVAX1上,并将G-L间隔区的非编码区替换为表达绿色荧光蛋白(GFP)的核苷酸,构建出表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组狂犬病毒HN10株全长基因组cDNA真核表达质粒,同时,在全长cDNA的两侧嵌入锤头状核酶(HamRz)和丁型肝炎病毒核酶(HdvRz)的序列,并置于CMV启动子的控制下,为下一步拯救出该嵌合病毒提供了可直接使用的全长cDNA真核表达质粒。
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| 关 键 词： | 狂犬病毒 全长cDNA 克隆 |
Construction and Analysis of Full-length cDNA Clone of Rabies Virus Street Strain |
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| Abstract: | To construct a expression plasmid containing the full-length cDNA of rabies virus,four overlapped fragments covering full length cDNA of rabies virus street stain HN10 were cloned into pVAX1 sequentially in the genome except for the G-L noncoding region which was replaced with GFP gene.The plasmid containing the full-length viral cDNA was flanked by hammerhead ribozyme(HamRz) and hepatitis delta ribozyme(HdvRz) sequences and arranged under the control of the cytomegalovirus(CMV) promoter.The constructed pla... |
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| Keywords: | rabies virus full-length cDNA cloning |
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