| K55R与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善 |
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| 引用本文： | 蔡少丽,林俊涵,王彩梅,林琳.K55R与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善[J].微生物学报,2007,23(4). |
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| 作者姓名： | 蔡少丽 林俊涵 王彩梅 林琳 |
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| 作者单位： | 福建师范大学生命科学学院, 福州 350007;福建师范大学生命科学学院, 福州 350007;福建师范大学生命科学学院, 福州 350007;福建师范大学生命科学学院, 福州 350007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.30270033）, 福建省自然科学基金 (No.B0120001 和 C0410009),福建省工业微生物研发平台建设项目(No.2006H0085)资助。 |
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| 摘 要： | 利用重叠延伸PCR对扩展青霉脂肪酶（PEL）基因进行体外定点突变，构建了K55R与随机突变体ep8叠加突变的重组质粒pAO815-ep8-K55R。将该质粒电转化引入毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115，进行异源表达。实验结果表明：该叠加突变体在毕赤酵母中获得了活性表达，得到表达产物脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS。其表达量为508u/mL,分别约为野生型脂肪酶PEL-GS（627u/mL）的81％，随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS（924u/mL）的55%；其比活力为2309.1u/mg,与随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS和野生型脂肪酶PEL-GS的相仿。叠加突变脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS的最适作用温度为37℃,与野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS一致；其Tm值为41.0℃，比野生型脂肪酶PEL-GS提高了2.3℃，比随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS提高了0.8℃。表明叠加突变脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS的热稳定性有了进一步的提高。
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| 关 键 词： | 扩展青霉脂肪酶 叠加突变 热稳定性 |
Improvement of the Thermostability of Penicillium expansum Lipase by Mutagenesis the Random Mutant Ep8 at K55R |
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| CAI Shao-Li,LIN Jun-Han,WANG Cai-Mei and LIN Lin.Improvement of the Thermostability of Penicillium expansum Lipase by Mutagenesis the Random Mutant Ep8 at K55R[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(4). |
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| Authors: | CAI Shao-Li LIN Jun-Han WANG Cai-Mei and LIN Lin |
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| Institution: | College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China;College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China;College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China;College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Penicillium expansum lipase double-mutagenesis thermostability |
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