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牛樟芝中一个新型还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析
引用本文:原晓龙,华 梅,陈 剑,王 娟,杨宇明,王 毅. 牛樟芝中一个新型还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析[J]. 广西植物, 2018, 38(9): 1146-1154
作者姓名:原晓龙  华 梅  陈 剑  王 娟  杨宇明  王 毅
作者单位:云南省林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31860177); 云南省对外科技合作计划项目(2015IA004); 云南省应用基础研究计划面上项目(2016FB055)[Surpported by the National Natural Science Foundation of China(31860177); Foreign Science and Technology Cooperation Plan of Yunnan Province(2015IA004); Applied Basic Research Plan in Yunnan Province(2016FB055)]。
摘    要:为了研究牛樟芝中PKS基因与化合物之间的关系,该研究通过对牛樟芝基因组分析获得牛樟芝聚酮合酶基因,以此序列为模板设计含有起始密码子和终止密码子的特异引物并以牛樟芝c DNA为模板克隆获得一个高度还原型PKS(HR-PKS)基因全长,命名为AcPKS2;对AcPKS2基因进行生物信息学分析,并比较该基因在不同培养基上的表达量。结果表明:AcPKS2全长7 842 bp,有24个内含子,其外显子共编码2 613个氨基酸,该蛋白的相对分子质量为293.5 kDa,理论等电点pI为5.78。用CDD分析其结构域显示,该基因属于HR-PKS,其结构域组织排列为KS-AT-DH-MT-ER-KR-ACP-TE,8个结构域其活性位点分别为β-酮基合成酶(DTACSSSL)、酰基转移酶(GHSIGETA)、脱水酶(RNDGSTSPL)、甲基转移酶(SFDIITAFDV)、烯酰还原酶(HAGVSSPAA)、酮基还原酶(GSPGQANYTAA)、酰基转移酶(YGLDSLTSVRL)、硫酯酶(KQPNGPY)。系统发育树显示AcPKS2与其他化合物未知的HR-PKS蛋白聚为一支,结构域和系统进化树分析显示该基因可能编码一种新的含TE结构域高度还原型聚酮合酶;表达分析结果显示葡萄糖和果糖能够诱导该基因的表达。

关 键 词:牛樟芝   高度还原型PKS   生物信息学分析   基因表达
收稿时间:2018-01-28

Cloning and expression analysis of a new reducing polyketide synthase gene in Antrodia camphorata
YUAN Xiaolong,HUA Mei,CHEN Jian,WANG Juan,Yang Yuming,Wang Yi. Cloning and expression analysis of a new reducing polyketide synthase gene in Antrodia camphorata[J]. Guihaia, 2018, 38(9): 1146-1154
Authors:YUAN Xiaolong  HUA Mei  CHEN Jian  WANG Juan  Yang Yuming  Wang Yi
Affiliation:Yunnan Provincial Key Laboratory of Cultivation and Exploition of Forest Plants, Key Laboratory for Conservation of Rare, Endanger & Endemic Forest Plants, State Forestry Administration, Yunnan Academy of Forestry, Kunming 650204, China
Abstract:
Keywords:Antrodia camphorata   highly reducing polyketide synthase   bioinformatics   gene expression
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