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纳米孔测序技术在实蝇类害虫检疫鉴定中的应用
引用本文:姜帆,丁新华,梁亮,付开赟,郭文超,朱水芳.纳米孔测序技术在实蝇类害虫检疫鉴定中的应用[J].生物安全学报,2024,33(1):93-98.
作者姓名:姜帆  丁新华  梁亮  付开赟  郭文超  朱水芳
作者单位:三亚中国检科院生物安全中心, 海南 三亚 572025;中国检验检疫科学研究院, 北京 100176;新疆农业科学院植物保护研究所, 农业农村部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室, 新疆 乌鲁木齐 830091;农业农村部规划设计研究院, 北京 100125
基金项目:三亚市科技创新专项项目(2022KJCX72);智力援疆创新拓展人才计划
摘    要:【目的】纳米孔测序技术是单分子实时测序技术的一种,正在被广泛应用于临床快速诊断及微生物检测等领域。本研究以实蝇这一类重要的检疫性有害生物为例,探究该技术在昆虫检疫鉴定中应用的可行性,为昆虫检疫鉴定提供新方法。【方法】分别采用一代测序技术和纳米孔测序技术,对14种经形态学鉴定的实蝇成虫进行DNA条形码测序,通过BOLD和NCBI数据库对测序结果进行比对分析,并比较2种测序技术所得序列结果准确性的差异。【结果】通过纳米孔测序,14个实蝇样品在44 min内获得181 Mb bases,每个样品平均得到11280条reads,单个reads的准确度为92.10%~94.53%;经一致性序列校正,所有实蝇样品均可得到与一代测序结果完全一致的序列,序列分析结果与形态学鉴定结果完全一致。【结论】采用本研究的实验流程和数据分析方法,纳米孔测序技术可以应用于实蝇类害虫的检疫鉴定,测序结果准确、高效;本研究提供的实验方案同样适用于基于扩增子测序的物种鉴定,满足大规模样品的高通量精准鉴定需求。

关 键 词:纳米孔测序  实蝇  昆虫  鉴定  扩增子
收稿时间:2022/12/31 0:00:00
修稿时间:2023/3/30 0:00:00

Preliminary investigation of quarantine and identification of Tephritidae based on nanopore sequencing technology
JIANG Fan,DING Xinhu,LIANG Liang,FU Kaiyun,GUO Wenchao,ZHU Shuifang.Preliminary investigation of quarantine and identification of Tephritidae based on nanopore sequencing technology[J].Journal of Biosafety,2024,33(1):93-98.
Authors:JIANG Fan  DING Xinhu  LIANG Liang  FU Kaiyun  GUO Wenchao  ZHU Shuifang
Institution:CAIQ Center for Biosafety, Sanya, Hainan 572025, China;Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100176, China;Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Northwestern Oasis, Institute of Plant Protection, Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Urumqi, Xinjiang 830091, China;Academy of Agricultural Planning and Engineering, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Beijing 100125, China
Abstract:
Keywords:nanopore sequencing  Tephritidae  insects  identification  amplicon
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