红色亚栖热菌TPS/TPP海藻糖合成途径中相关基因的克隆、表达及功能鉴定 |
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作者姓名: | 朱玥明 唐亦辰 徐恒毅 张娟 魏东盛 邢来君 李明春 |
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作者单位: | 南开大学微生物学系,分子微生物学与技术教育部重点实验室,天津,300071 |
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基金项目: | 天津市应用基础研究计划重点项目(No.06YFJZJC02100);;国家大学生创新性实验计划(No.081005509)资助~~ |
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摘 要: | 通过构建红色亚栖热菌(Meiothermus ruberCBS-01)的基因组DNA文库,克隆得到该嗜热菌海藻糖合成途径中的磷酸海藻糖合成酶(TPS)和磷酸海藻糖磷酸酯酶(TPP)基因。以pET21a为表达载体,将磷酸海藻糖合成酶和磷酸海藻糖磷酸酯酶在大肠杆菌中进行表达并纯化,利用薄层层析的方法验证了这两个酶的活性。同时,本研究检测了红色亚栖热菌在各种环境压力下细胞内含物成分的变化情况,发现在高渗环境压力的诱导下,该菌会在胞内积累大量的6-磷酸海藻糖,而并非海藻糖,这为进一步研究TPS/TPP和TreS途径在细胞体内的作用奠定了基础。
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关 键 词: | 红色亚栖热菌 海藻糖 海藻糖合成途径 磷酸海藻糖合成酶(TPS) 磷酸海藻糖磷酸酯酶(TPP) |
收稿时间: | 2008-10-15 |
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