| 斑马鱼胚胎的简易无菌培养体系及单增李斯特菌感染试验北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 单颖,张亦凯,程昌勇,方春,彭金荣,方维焕.斑马鱼胚胎的简易无菌培养体系及单增李斯特菌感染试验北大核心CSCD[J].微生物学报,2016,56(11):1766-1775. |
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| 作者姓名： | 单颖 张亦凯 程昌勇 方春 彭金荣 方维焕 |
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| 作者单位： | 浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058,浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058,浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058,浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058,浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058,浙江大学动物科学学院, 浙江大学动物预防医学研究所, 浙江 杭州 310058 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业专项（201303041） |
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| 摘 要： | 【目的】斑马鱼的生活环境中微生物众多,会激活其先天免疫系统,从而影响相关试验结果,因此需建立适合于感染与免疫研究的斑马鱼无菌培养体系。【方法】建立了基于受精卵短时消毒和温控正压无菌隔离器的培养流程;根据无菌动物标准对斑马鱼胚胎及其生活环境进行微生物检测;并通过定量PCR检测无菌斑马鱼先天免疫相关基因(TLRs)表达水平;利用无菌斑马鱼胚胎模型进行了单增李斯特菌感染试验。【结果】本研究成功建立了斑马鱼培育的无菌操作系统,无菌检验结果显示其生活环境及体内不含病原微生物,先天免疫分子TLRs表达量较低或不表达,而常规培养斑马鱼以及浸泡感染单增李斯特菌的无菌斑马鱼中这些基因转录水平较高。无菌斑马鱼对单增李斯特菌强毒株EGDe静脉注射感染很敏感,100 CFU感染量能导致鱼在1周内全部死亡,而其mpl或plc B基因缺失株感染后致死率显著下降(分别为70%和40%)。巨噬细胞在亲本株EGDe浸泡感染的鱼肠道周围聚集,而mpl或plc B基因缺失株感染的鱼中几乎观察不到这一聚集现象。【结论】通过简易培养体系获得的无菌斑马鱼胚胎可用于先天免疫和病原感染机制等研究。
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| 关 键 词： | 无菌斑马鱼胚胎 先天免疫 单核细胞增生李斯特菌 |
| 收稿时间： | 2016/3/11 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2016/6/21 0:00:00 |
A simplified system for generation of germ-free zebrafish embryos and its application in Listeria monocytogenes infection |
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| Ying Shan,Yikai Zhang,Changyong Cheng,Chun Fang,Jinrong Peng and Weihuan Fang.A simplified system for generation of germ-free zebrafish embryos and its application in Listeria monocytogenes infection[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(11):1766-1775. |
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| Authors: | Ying Shan Yikai Zhang Changyong Cheng Chun Fang Jinrong Peng and Weihuan Fang |
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| Institution: | Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China,Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China and Institute of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | germ-free zebrafish embryos innate immunity Listeria monocytogenes |
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