人星状病毒非结构蛋白C末端nsP1a/4蛋白6种删除突变体的构建与表达分析 |
| |
引用本文: | 赵微,牛科,赵健,金一鸣,隋婷婷,王文.人星状病毒非结构蛋白C末端nsP1a/4蛋白6种删除突变体的构建与表达分析[J].病毒学报,2013(5):548-554. |
| |
作者姓名: | 赵微 牛科 赵健 金一鸣 隋婷婷 王文 |
| |
作者单位: | 辽宁医学院基础医学院实验动物教研室;辽宁医学院附属第一医院 |
| |
基金项目: | 国家自然科学青年基金项目(No.81201285);辽宁省教育厅基金项目(No.L2011142) |
| |
摘 要: | 星状病毒(Human astrovirus,HAstV)是通过引起小肠上皮细胞凋亡从而导致婴幼儿腹泻的重要病原体。课题组前期研究表明HAstV非结构蛋白nsP1aC末端蛋白nsP1a/4是诱导凋亡的主要功能性蛋白,可能含有与凋亡相关的重要结构域。为了探索nsP1a/4蛋白中的凋亡结构域,本研究采用绿色荧光蛋白真核表达载体,根据nsP1a/4蛋白功能性结构域的位置,选择不同的删除位点,构建nsP1a/4蛋白及不同结构域删除的nsP1a/4蛋白突变体,并将其转染BHK21细胞,在转染的24~72h检测重组蛋白在细胞内的表达并进行初步分析。结果显示,24h后荧光显微镜下可观察到融合nsP1a/4蛋白和其突变体的绿色荧光。Western blot分析结果显示7种融合蛋白均能在体外细胞中高效表达,72h表达量明显高于48h。这些结果表明我们构建的nsP1a/4蛋白及其删除突变体可在BHK21细胞中表达,可用于HAstV非结构蛋白nsP1a/4的凋亡结构域研究,从而为进一步研究HAstV分子致病机制提供研究平台。
|
关 键 词: | 星状病毒 非结构蛋白 融合蛋白 删除突变 凋亡机制 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|