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近暗散白蚁β-葡糖苷酶基因RpBg7的克隆及其在毕赤酵母中的表达
作者姓名:苏丽娟  肖元玺  李琰  伍志伟  赵鹏飞  楚君鹏  魏纪珍  安世恒  尹新明  宋安东
作者单位:1. 河南农业大学生命科学学院;2. 河南农业大学植物保护学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31170350);;河南省高等学校重点科研项目(20A210004);
摘    要:【目的】白蚁是自然界中利用木质纤维素能力很强的生物,是纤维素酶的天然资源库。本研究旨在挖掘新来源的纤维素酶基因,为生物质能源的高效利用提供新的天然酶。【方法】根据前期蛋白质组测序的结果,利用PCR结合RACE克隆了近暗散白蚁Reticulitermes perilucifugusβ-葡糖苷酶7(β-glucosidase 7)基因RpBg7 c DNA全长序列;通过生物信息学软件分析了RpBg7的序列;用表达载体pPICZαA在毕赤酵母Pichia pastoris X-33中表达Rp Bg7蛋白,并用4-硝基苯基-β-d-吡喃葡萄糖苷(4-nitrophenylβ-d-glucopyranoside,4pNPG)为底物检测了表达的RpBg7蛋白的酶活性。【结果】获得了近暗散白蚁的一个内源性β-葡糖苷酶7基因RpBg7(GenBank登录号:MN944395),其开放阅读框长1 485 bp,编码495个氨基酸残基。RpBg7蛋白预测分子量为57 kD,属于糖苷水解酶1(glycoside hydrolase 1,GH1)家族,具有保守的碱性氨基酸残基Glu187和Glu394。通过毕...

关 键 词:近暗散白蚁  β-葡糖苷酶  纤维素酶  毕赤酵母  木质纤维素
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