双功能质粒的构建与功能表达 |
| |
引用本文: | 黄培堂,张林元,熊凌霜,郑永木,张兆山,马清钧.双功能质粒的构建与功能表达[J].遗传学报,1982(4). |
| |
作者姓名: | 黄培堂 张林元 熊凌霜 郑永木 张兆山 马清钧 |
| |
作者单位: | 军事医学科学院 北京
(黄培堂,张林元,熊凌霜,郑永木,张兆山),军事医学科学院 北京(马清钧) |
| |
摘 要: | 将大肠杆菌抗四环素、氨基苄青霉素、氯霉素质粒pBR325和金黄色葡萄球菌/枯草杆菌抗新霉素、卡那霉素质粒pUB110,在体外经限制性内切酶EcoRI和T4 DNA连接酶作用,进行重组,获得了重组质粒pMM 1。pMM 1兼有抗四环素、氨基苄青霉素、卡那霉素和新霉素以及对氯霉素敏感的特性;用凝胶电泳法测定分子量,证明pMM1确为pBR325和pUB110两者的重组质粒。pMM 1在大肠杆菌中的转化频率为每微克DNA 0.79×10~3个转化子,在枯草杆菌受体中为每微克DNA 0.15×10~2个转化子。pMM1不仅能分别在大肠杆菌和枯草杆菌两种受体中复制,而且能同样表达,其抗药性水平为:对氨基苄青霉素不小于每毫升160微克,对四环素不小于每毫升120微克,对新霉素、卡那霉素不小于每毫升80微克。此外,用同样的方法构建了pBR 322和pUB 110的另一个重组质粒pMM 2,也获得了类似的结果。
|
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|