| 小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能 |
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| 引用本文： | 吕萍,龚瑶琴,李江夏,周海斌,陈丙玺.小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能[J].中国生物化学与分子生物学报,2005(5). |
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| 作者姓名： | 吕萍 龚瑶琴 李江夏 周海斌 陈丙玺 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院医学遗传学研究所，实验畸形学教育部重点实验室，山东大学医学院医学遗传学研究所，实验畸形学教育部重点实验室，山东大学医学院医学遗传学研究所，实验畸形学教育部重点实验室，山东大学医学院医学遗传学研究所，实验畸形学教育部重点实验室，山东大学医学院医学遗传学研究所，实验畸形学教育部重点实验室 济南250012，济南250012，济南250012，济南250012，济南250012 |
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| 基金项目： | 教育部科学技术研究重点项目(No.02129)资助~~ |
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| 摘 要： | 为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp~ 132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,以不同的引物扩增出不同长短的DNA片段,分别定向克隆到含小鼠Lrp5基因基本启动子并含有荧光素酶报道基因的pGL3-103载体上,构建了12种荧光素酶报告基因表达体系:pGL3-267,pGL3-513,pGL3-535,pGL3-560,pGL3-575,pGL3-623,pGL3-645,pGL3-719,pGL3-770,pGL3-1032,pGL3-1330,pGL3-1619.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7细胞,48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性,pGL3-575(-2909bp~-2334bp)活性是pGL3-513(-2909bp~-2396bp)的20%,pGL3-535(-2909bp~-2374bp)的活性是pGL3-513的44%,pGL3-575的活性是pGL3-560(-2909bp~-2349bp)的48%,均有显著性差异.结果表明,在-2396bp与-2374bp之间的22bp区域内以及-2349bp与-2334bp之间的15bp区域内存在负调控元件.软件分析表明,此区域含有IK2,LYF1及MZF1调控元件.
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| 关 键 词： | LDL受体相关蛋白5 小鼠 Lrp5基因 调控序列 荧光素酶分析 |
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