布朗葡萄藻脂质含量的荧光光谱检测方法的改进 |
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作者姓名: | 刘新颖 汪志平 于金鑫 吕蓓芬 马丽芳 陈子元 |
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作者单位: | 浙江大学原子核农业科学研究所农业部核农学重点开放实验室,浙江 杭州,310029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.10975118);公益性行业(农业)科研专项(No.201103007);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA050101);浙江省院士基金(Nos.J20080388,J20110445)资助~~ |
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摘 要: | 布朗葡萄藻是一种含脂量高、开发潜力大的能源微藻,但因其细胞呈集落态且胞壁较坚厚,应用传统的尼罗红荧光光谱法测定其脂质含量时,通常因灵敏度低、重复性差而难以获得可靠结果.本研究通过超声波分散集落、二甲基亚砜辅助尼罗红进入细胞、优化染色条件,有效地解决了上述问题.具体方法为:藻液先经频率为20 kHz、发射功率为100 W的超声波按1 s/1 s(开/关)间歇处理20 s使细胞分散,而后依次加入与藻液等体积的15%二甲基亚砜溶液和3μg/mL尼罗红溶液,充分混匀后于黑暗中40℃染色10min,再于490nm激发光下进行荧光光谱检测.上述改进方法与传统方法相比,检测灵敏度提高了196.6%,反映检测重复性的相对标准偏差(RSD)由10.91%降至1.84%.该方法为布朗葡萄藻育种与培养等研究提供了快速、灵敏的脂质含量检测技术.
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关 键 词: | 布朗葡萄藻 脂质 荧光光谱法 尼罗红 二甲基亚砜 超声波 |
收稿时间: | 2012-09-18 |
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