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根瘤菌中甲硫氨酸亚砜还原酶底物蛋白的筛选与相互作用验证
引用本文:韦曼丽,姚演兰,闭寒思,郭荣兴,何宝源,李岚,易弋,黄翠姬,佀再勇.根瘤菌中甲硫氨酸亚砜还原酶底物蛋白的筛选与相互作用验证[J].微生物学报,2024,64(3):780-794.
作者姓名:韦曼丽  姚演兰  闭寒思  郭荣兴  何宝源  李岚  易弋  黄翠姬  佀再勇
作者单位:广西科技大学生物与化学工程学院, 广西 柳州 545006
基金项目:广西自然科学基金(2023GXNSFAA026398);广西高校中青年教师科研基础能力提升项目(2022KY0347);广西大学生创新创业训练计划(S202110594128);广西科技大学博士基金(校科博20Z33)
摘    要:根瘤菌在侵染豆科植物过程中会受到活性氧的氧化胁迫,含甲硫氨酸的蛋白质易被氧化成甲硫氨酸亚砜导致蛋白结构和功能改变,甲硫氨酸亚砜还原酶(methionine sulfoxide reductases, Msrs)能将甲硫氨酸亚砜还原成甲硫氨酸,恢复蛋白的结构和功能。前期在华癸中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii) 7653R基因组中发现有4个Msrs和抗氧化压力密切相关,但其作用机制仍不清楚。【目的】通过筛选4个Msrs的相互作用底物,为阐明4个Msrs在M. huakuii 7653R中的作用机制提供证据。【方法】按照甲硫氨酸含量由高到低统计M. huakuii 7653R中所有蛋白的分布情况;利用蛋白互作网站预测获得4个Msrs的候选互作底物,将预测互作底物进行功能注释基因本体(gene ontology, GO)分析和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)代谢通路分析;通过细菌双杂交初步验证它们之间的相互作用。【结果】甲硫氨酸含量百分数分布基本呈正态分布形式,位于中间百分数的蛋白最多,位于两边的蛋白较少;筛选获得有6个抗氧化酶和6个转录调控因子是4个Msrs的候选互作底物;细菌双杂交显示,有2个抗氧化酶和5个转录调控因子确实和4个Msrs存在不同程度的相互作用。【结论】为阐明Msrs在根瘤菌M. huakuii 7653R中抵抗氧化压力的作用机制提供了证据,为揭示根瘤菌抵抗活性氧提供了新的思路和方向。

关 键 词:活性氧  甲硫氨酸亚砜还原酶  根瘤菌  氧化胁迫  细菌双杂交  互作底物
收稿时间:2023/8/5 0:00:00
修稿时间:2023/9/15 0:00:00

Screening and verification of substrate proteins of methionine sulfoxide reductase in rhizobia
WEI Manli,YAO Yanlan,BI Hansi,GUO Rongxing,HE Baoyuan,LI Lan,YI Yi,HUANG Cuiji,SI Zaiyong.Screening and verification of substrate proteins of methionine sulfoxide reductase in rhizobia[J].Acta Microbiologica Sinica,2024,64(3):780-794.
Authors:WEI Manli  YAO Yanlan  BI Hansi  GUO Rongxing  HE Baoyuan  LI Lan  YI Yi  HUANG Cuiji  SI Zaiyong
Institution:School of Biological and Chemical Engineering, Guangxi University of Science and Technology, Liuzhou 545006, Guangxi, China
Abstract:
Keywords:reactive oxygen species  methionine sulfoxide reductase  rhizobia  oxidative stress  bacterial two-hybrid system  interacting substrates
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