| 大鼠肾脏三肽基肽酶Ⅰ物理化学性质和氨基酸顺序分析 |
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| 作者姓名： | 杜培革 刘华欣 傅桂莲 大久保岩男 |
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| 作者单位： | 北华大学医学院,中国吉林,吉林,132001;第四军医大学吉林军医学院,中国吉林,吉林,132011;滋贺医科大学,日本大津市,520-2192 |
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| 基金项目： | 财团法人滋贺医学国际协力会资助项目 |
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| 摘 要： | 为进一步探讨三肽基肽酶Ⅰ(TripeptidylpeptidaseI,TPPI)的物理化性质和酶的动力学特征,通过SP 琼脂糖凝胶(SP sepharose),Phenyl cellulofine,ResorceS,超葡聚糖凝胶(SuperdexG 75)柱层析的方法,提纯大鼠肾脏三肽基肽酶Ⅰ并测定它的分子量、理化性质、酶的动力学参数及N 末端氨基酸顺序.经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定后,得到了单一区带.提纯倍率约为8000倍.用SDS PAGE时,β 巯基乙醇(β ME)不存在和存在下,其分子量为43kD和46kD.用非变性 PAGA时,其分子量为280kD.在pH2.2～10.5范围内,TPPI具有水解Ala Ala Phe MCA的活性.该酶对于Ala Ala Phe MCA的最适pH值为3.5～4.5.在最适pH4.0条件下,对Ala Ala Phe MCA底物的Km、Vmax、Kcat和Kcat Km值分别是:680μmol L,3.7mmol (g·min),33.1 s和4.87×104 (s·mol).TPPI能被对氯汞苯甲酸盐(PCMBS)和HgCl2强烈地抑制,被二异丙基氟磷酸酯(DFP)中等程度地抑制.TPPI是受巯基试剂调节的丝氨酸酶.
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| 关 键 词： | 大鼠肾脏 三肽基肽酶I 提纯 特性 分析 |
| 文章编号： | 1007-7847(2003)02-0133-06 |
| 修稿时间： | 2003-01-11 |
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