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| 大肠杆菌BL21(DE3)lpxM突变株的构建 | |
| 引用本文： | 张君,方宏清,谢达平,刘志敏,陈惠鹏.大肠杆菌BL21(DE3)lpxM突变株的构建[J].生物技术通讯,2006,17(4):489-492. |
| 作者姓名： | 张君 方宏清 谢达平 刘志敏 陈惠鹏 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071;湖南农业大学,理学院,湖南,长沙,410128 2. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071 3. 湖南农业大学,理学院,湖南,长沙,410128 |
| 摘 要： | 目的:lpxM基因失活可以产生极低内毒素活性的脂多糖。构建大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株,并考察该突变株的生长状态和表达重组蛋白的能力。方法:构建同源臂长500bp左右的打靶载体,借助Red同源重组系统,使E.coliBL21(DE3)的lpxM基因发生插入失活,再导入编码FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20去除抗性基因。PCR鉴定发生插入突变的菌株,应用SDS-PAGE分析突变前后的脂多糖,考查对重组蛋白表达的影响。结果:PCR鉴定结果说明lpxM基因发生了插入突变。与出发株比较,突变株的脂多糖电泳图谱发生了明显变化,但其生长状态与表达重组蛋白的能力与出发株基本一致。结论:大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株可以用于重组蛋白的表达。 |
| 关 键 词： | 大肠杆菌BL21(DE3) lpxM基因 Red同源重组系统 |
| 文章编号： | 1009-0002(2006)04-0489-04 |
| 收稿时间： | 02 18 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年2月18日 |
Construction of a Mutant E.coli BL21(DE3) with Inactivated lpxM |
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| ZHANG Jun,FANG Hong-qing,XIE Da-ping,LIU Zhi-min,CHEN Hui-peng.Construction of a Mutant E.coli BL21(DE3) with Inactivated lpxM[J].Letters in Biotechnology,2006,17(4):489-492. | |
| Authors: | ZHANG Jun FANG Hong-qing XIE Da-ping LIU Zhi-min CHEN Hui-peng |
| Institution: | 1. Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071; 2. College of Sciences, Hunan Agariculture University, Changsha 410128, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | E coli BL21(DE3) lpxM gene Red homologous recombinant |
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