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| 鹅细小病毒长春分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的原核表达 | |
| 引用本文： | 李雪梅,章金刚,向华,陈晓月,金宁一,费恩阁.鹅细小病毒长春分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的原核表达[J].生物技术通讯,2002,13(5):331-333. |
| 作者姓名： | 李雪梅 章金刚 向华 陈晓月 金宁一 费恩阁 |
| 作者单位： | 1. 解放军军需大学,动物科技系,长春,130062;清华大学,结构生物学实验室,北京,100084 2. 解放军军需大学,动物科技系,长春,130062;军事医学科学院,输血医学研究所,北京,100850 3. 解放军军需大学,动物科技系,长春,130062 4. 解放军军需大学,军事兽医研究所,长春,130062 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(39870557)，教育部和总后勤部回国人员启动基金项目(98H026) |
| 摘 要： | 根据国外巳发表的鹅细小病毒（GPV）A株基因组核苷酸序列，设计并合成了一对用于GPV主要结构蛋白（VP2-VP3）基因表达的引物。利用合成的引物，扩增并鉴定了GPV中国长春株（GPV CC株）的VP2-VP3基因。将扩增的目的的基因插入到原核表达载体pET28(a)的多克隆位点，构建了表达GPV，VP2-VP3基因的原核载体pEGVP1。重组表达载体质粒转化BL21宿主菌，经IPTG诱导，SDS-PAGE检测到大小分别为75000和58000的表达蛋白带。Western blot分析表明，表达产物具有很好的特异性。 |
| 关 键 词： | 鹅细小病毒 长春分离株 结构蛋白 （VP2－VP3） 原核表达 基因表达 |
| 文章编号： | 1009-0002(2002)05-0331-03 |
| 修稿时间： | 2002年6月26日 |
Expression of the major structural protein(VP2-VP3) gene of a Chinese isolate, goose parvovirus in E.coli |
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| LI Xue-mei ,ZHANG Jin-gang ,XIANG Hua ,CHEN Xiao-yue ,JIN Ning-yi ,FEI En-ge.Expression of the major structural protein(VP2-VP3) gene of a Chinese isolate, goose parvovirus in E.coli[J].Letters in Biotechnology,2002,13(5):331-333. | |
| Authors: | LI Xue-mei ZHANG Jin-gang XIANG Hua CHEN Xiao-yue JIN Ning-yi FEI En-ge |
| Institution: | LI Xue-mei 1,2,ZHANG Jin-gang 1,3,XIANG Hua 1,CHEN Xiao-yue 1,JIN Ning-yi 4,FEI En-ge 1 |
| Abstract: | According to nucleotide suquence of GPV A strain,a pairs of primers were designed and synthesized,and mutated the VP2ACG codon to ATG one.The complete VP2-VP3(the major structural protein)genes of a Chinese isolate stain(GPV CC)was amplified by PCR,and obtained a DNA fragment with the sizes of1.8kb.The PCR prod-uct was digested with Bam HI and the resulting fragment was inserted into the Bam HI site of the pET28(a)under the downstream sequences.E.coli component host BL21was transformed with the recombinant.The recombinant bac-teria could express the VP2-VP3gene after induced by IPTG,and the recombinant protein were analyzed on12%SDS-PAGE and stained with comass brilliant blue or had been detected by immunblotting analysis with anti-GPV serum. |
| Keywords: | goose parvovirus VP2-VP3 prokaryotic system expression |
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