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| 扩展青霉碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的高效表达 | |
| 作者姓名： | 袁彩 林琳施巧琴 吴松刚 |
| 作者单位： | 福建师范大学生物工程学院,福州 350007 |
| 摘 要： | 将编码扩展青霉碱性脂肪酶（PEL）的cDNA克隆到酵母整合型质粒pPIC3.5K,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,通过橄榄油 MM平板及PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDS PAGE分析、橄榄油检验板鉴定,表明扩展青霉碱性脂肪酶基因在巴斯德毕赤酵母中获得了高效表达。表达蛋白分泌至培养基中,分子量约28kD,与扩展青霉碱性脂肪酶大小一致,占分泌蛋白的95%。橄榄油检验板检验表明该表达蛋白可分解橄榄油,通过优化该表达菌的发酵条件,以橄榄油为底物进行酶活测定,其发酵液酶活可达260 u/mL。 |
| 关 键 词： | 扩展青霉碱性脂肪酶 巴斯德毕赤酵母 基因表达 |
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