| 骨桥蛋白RGD黏附序列多拷贝短肽的表达、纯化及生物学活性测定 |
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| 引用本文： | Wu HY,Wen JK,Han M. 骨桥蛋白RGD黏附序列多拷贝短肽的表达、纯化及生物学活性测定[J]. 中国应用生理学杂志, 2008, 24(3): 324-328 |
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| 作者姓名： | Wu HY Wen JK Han M |
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| 作者单位： | 河北医科大学生物化学与分子生物学研究室、河北省医学生物技术重点实验室,河北石家庄050017 |
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| 摘 要： | 目的:用大肠杆菌表达骨桥蛋白RGD黏附序列6拷贝短肽,经分离纯化后检测其生物学活性.方法:运用基因重组技术,将骨桥蛋白RGD黏附序列的核酸片段首尾相连,与携带GST编码序列的原核表达载体连接构建融合蛋白表达质粒pGEX-3X-RGD.将重组质粒转化宿主菌后,对诱导融合蛋白表达的条件进行优化.表达产物GST-RGD经谷胱甘肽-亲和层析纯化后,分别检测其对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移的影响.结果:所构建的含有6个拷贝短肽的GST-RGD融合蛋白可在大肠杆菌中以包含体的形式进行表达.用十二烷基肌氨酸钠变性溶解包含体及透析复性后,经亲和层析可得到高纯度的GST-RGD(6)融合蛋白.GST-RGD(6)融合蛋白能特异性的抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞的黏附和迁移.结论:骨桥蛋白RGD黏附序列6拷贝短肽可在大肠杆菌中高效表达,纯化的GST-RGD融合蛋白具有抑制血管平滑肌细胞黏附和迁移的活性.
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| 关 键 词： | 骨桥蛋白 GST-RGD融合蛋白 原核细胞表达 生物学活性 |
Expression of osteopontin RGD peptide in E. coli and its biological activities |
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| Wu Hong-Yu,Wen Jin-Kun,Han Mei. Expression of osteopontin RGD peptide in E. coli and its biological activities[J]. Chinese journal of applied physiology, 2008, 24(3): 324-328 |
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| Authors: | Wu Hong-Yu Wen Jin-Kun Han Mei |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, Institute of Basic Medicine, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China. |
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