| 抑制RANKL诱导破骨细胞分化的DNA适配子的筛选 |
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| 引用本文： | 吴太林,沙 鑫,李 锋,张波波,马文瑞,陶惠人.抑制RANKL诱导破骨细胞分化的DNA适配子的筛选[J].现代生物医学进展,2017,17(17):3220-3224. |
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| 作者姓名： | 吴太林 沙 鑫 李 锋 张波波 马文瑞 陶惠人 |
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| 作者单位： | 第四军医大学西京医院骨科 陕西 西安 710032;第四军医大学西京医院心身科 陕西 西安 710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81070698; 81170256）；陕西省科技统筹创新工程计划（2015KTCL03-09） |
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| 摘 要： | 目的:筛选能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白并有效抑制RANKL对破骨细胞诱导分化作用的DNA适配子。方法:首先,采用原核系统表达并纯化RANKL蛋白,通过SELEX(Systematic evolution of ligands by exponential)技术从人工合成的单链随机寡核苷酸文库中筛选能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白的DNA适配子。然后,用RNAfolding sever software分析适配子空间结构,以ELISA检测DNA适配子和RANKL亲和力大小并筛选出亲和力最高的一组DNA适配子用以验证DNA适配子对RANKL诱导破骨细胞分化的抑制作用。结果:(1)成功在原核系统表达并纯化RANKL蛋白;(2)筛选出能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白的12个DNA适配子。(3)与对照组相比,不同浓度DNA适配子能明显抑制TRAP阳性破骨细胞数量(P0.05),且浓度越高抑制效果越明显。结论:成功筛选出的DNA适配子能特异性结合RANKL蛋白并有效抑制RANKL对破骨细胞的诱导分化功能。
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| 关 键 词： | 核因子κB受体活化因子配体 指数富集的配基系统进化技术 适配子 破骨细胞 |
| 收稿时间： | 2017/2/10 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/2/26 0:00:00 |
Identification of a DNA Aptamer Inhibiting RANKL-induced Osteoclastogenesis in Vitro |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RANKL SELEX Aptamer Osteoclasts |
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