| 人snail真核表达载体构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 杨乐 郭晓波 陈洪志 成健 董济民 丁海霞 王冠杰. 人snail真核表达载体构建与鉴定[J]. 现代生物医学进展, 2017, 17(3): 410-413 |
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| 作者姓名： | 杨乐 郭晓波 陈洪志 成健 董济民 丁海霞 王冠杰 |
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| 作者单位： | 西安交通大学附属西安市中心医院肿瘤科；西安交通大学附属西安市中心医院血液科；西安交通大学附属西安市中心医院妇产科 |
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| 基金项目： | 陕西省自然科学基础研究计划项目（2014JM2-8182） |
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| 摘 要： | 目的:构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法:使用RT-PCR法获取人snail基因全长c DNA,经Bam H I、Eco R I双酶切、连接,插入pc DNA3.1(+)真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达。结果:pc DNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBI Gen Bank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高。结论:成功构建pc DNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | Snail；重组质粒；载体构建 |
Construction and Identification of Human Snail Gene Eukaryotic Vector |
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| Keywords: | Snail Recombinant plasmid Vector construction |
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