| MiR-381下调Hes1表达调控神经干细胞增殖和向神经元的分化 |
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| 引用本文： | 史晓东,郑娇琳,焉春华,田佳楠,李 慧,马 煦,王晓坤,聂雪丹,杨春晓.MiR-381下调Hes1表达调控神经干细胞增殖和向神经元的分化[J].现代生物医学进展,2017,17(20):3821-3826. |
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| 作者姓名： | 史晓东 郑娇琳 焉春华 田佳楠 李 慧 马 煦 王晓坤 聂雪丹 杨春晓 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学附属第二医院神经科 黑龙江 哈尔滨150081;哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸科 黑龙江 哈尔滨150081 |
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| 基金项目： | 黑龙江省卫生计生委科研课题（2016-071） |
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| 摘 要： | 目的:探讨miRNA-381在神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的体外增殖、分化中的作用及相关机制。方法:采用光镜观察法、免疫组化法对原代获取及诱导分化后的NSCs予以鉴定;QPCR及Western blot法检测miRNA-381、nestin、β-tubulin-Ⅲ和Hes1的mRNA及蛋白表达;CCK-8法检测不同时间点NSCs的增殖情况;荧光素酶报告基因法验证miR-381对Hes1野生型及突变型3'非编码结合区的靶向作用。结果:原代培养细胞呈明显的神经球形态,且高表达nestin蛋白,经b FGF诱导后则高表达β-tubulin-Ⅲ;miR-381转染后,NSCs中miR-381、nestin、β-tubulin-Ⅲ的mRNA和蛋白水平均明显升高(p0.001),免疫荧光法也进一步验证miR-381转染后的NSCs其β-tubulin-Ⅲ的荧光强度显著增强;此外,miR-381转染24 h、48 h及72 h后,NSCs的增殖能力均高于阴性对照组(p24h0.01,p48h0.001,p72h0.001);荧光素酶法结果显示miR-381能显著降低野生型Hes1载体的3'非编码区的荧光素酶活性,而Hes1基因载体的突变型3'UTR的荧光素酶活性不受到miR-381的影响(p0.001);另外,miR-381过表达能明显降低Hes1蛋白的表达;而二者共转染的NSCs增殖能力在转染后24 h、48 h及72 h,均明显低于单纯miR-381转染组(p0.01或p0.001);同时,共转染后β-tubulin Ⅲ的mRNA及蛋白水平均明显低于单纯miR-381转染组(p0.001)。结论:miR-381通过下调Hes1表达促进NSCs的增殖和向神经元的分化。
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| 关 键 词： | 神经干细胞 神经元 微小RNA-381 发状分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split 1 Hes1) |
| 收稿时间： | 2017/1/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/1/28 0:00:00 |
MiR-381 Promotes the Proliferation and Differentiation of Neural Stem Cell via down-regulating Hes1 Expression |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Neural stem cells Neuron miRNA-381 Hes1 |
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