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膀胱癌细胞来源外泌体的提取与鉴定
引用本文:薛 梅,陈 葳,向 安,潘晶晶,庞 欢,李 旭.膀胱癌细胞来源外泌体的提取与鉴定[J].现代生物医学进展,2017,17(31):6010-6013.
作者姓名:薛 梅  陈 葳  向 安  潘晶晶  庞 欢  李 旭
作者单位:西安交通大学第一附属医院转化医学中心 陕西 西安 710061;陕西省肿瘤精准医学重点实验室 陕西 西安 710061;西安交通大学第一附属医院检验科 陕西 西安 710061;第四军医大学药学系 陕西 西安 710032
基金项目:国家自然科学基金项目(81502529, 81301513, 81372151, 81572735);西安交通大学第一附属医院院基金项目(2014YK9)
摘    要:目的:提取并鉴定膀胱癌5637细胞来源外泌体。方法:收集膀胱癌5637细胞培养上清液,采用多步骤离心法提取膀胱癌5637细胞外泌体。透射电子显微镜观察外泌体形态及颗粒直径。Bradford法定量外泌体蛋白含量。蛋白质免疫印迹鉴定外泌体标志蛋白。结果:20 m L 5637细胞培养基可收集约50-80μg外泌体。膀胱癌5637细胞来源外泌体呈典型的茶杯样形态,外泌体颗粒直径大约在30-150 nm。膀胱癌5637细胞外泌体提取物中可检测到标志蛋白CD63、TSG101、Hsp70和Hsp90表达。结论:多步骤离心法可以用于提取膀胱癌5637细胞外泌体,为后续开展膀胱癌5637细胞外泌体作用与机制的研究奠定了基础。

关 键 词:膀胱癌细胞  外泌体  离心  鉴定
收稿时间:2017/3/8 0:00:00
修稿时间:2017/3/31 0:00:00

Isolation and Characterization of Exosomes Derived from Bladder Cancer Cells
Abstract:
Keywords:Bladder cancer cells  Exosomes  Centrifugation  Characterization
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