一个新的产黄青霉谷胱甘肽转移酶基因的克隆和鉴定 |
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作者姓名: | 张媛 王富强 郑桂珍 戴梦 刘静 赵颖 任志红 赵宝华 贾茜 |
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作者单位: | 1. 河北师范大学生命科学学院,石家庄,050016;华北制药集团新药研究开发有限责任公司,石家庄,050015 2. 华北制药集团新药研究开发有限责任公司,石家庄,050015 3. 河北师范大学生命科学学院,石家庄,050016 |
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摘 要: | 以产黄青霉(Penicillium chrysogenum Thom)cDNA为模板,克隆得到一个新的谷胱甘肽转移酶基因PcgstB,其开放阅读框长651bp,编码216个氨基酸的蛋白质。与已知序列进行BLASTp比较显示,该蛋白具有保守的GST结构域,与烟曲霉GstB的序列一致性最高,达65%。将PcgstB与原核表达载体pTrc99A连接得到表达质粒pTrc-gstB,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导后获得以可溶形式表达的重组PcGstB蛋白。以1-chloro-2,4-dinitrobenzene(CDNB)为底物检测,确认该蛋白具有GST活性。
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关 键 词: | 谷胱甘肽转移酶 产黄青霉 原核表达 活性测定 |
文章编号: | 1000-3061(2007)04-0168-05 |
修稿时间: | 2006-11-23 |
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