细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化 |
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引用本文: | 王文恭,童坦君.细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(3):309-313. |
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作者姓名: | 王文恭 童坦君 |
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作者单位: | 北京医科大学生物化学与分子生物学系 |
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摘 要: | 为探讨凋亡过程中,bcl-2基因下调与该基因甲基化状态的关系,用5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导小鼠成纤维细胞NC3H10,TC3H10及人乳腺癌细胞MCF-7的凋亡,分别检测了这三种细胞凋亡过程中bcl-2的表达变化,与其调控区及编码区的甲基化状况.我们曾观察到5-Fu作用24~48h出现细胞存活率下降,DNA梯状断裂及细胞周期凋亡峰显现等典型凋亡现象.Northern杂交显示,在5-Fu作用12h时bcl-2mRNA水平已明显降低.由此,我们用小鼠bcl-2(mbcl-2)及人bcl-2(hbcl-2)基因调控区PCR扩增片段及bcl-2编码区(cDNA)片段作为探针,与5-Fu作用12h的细胞DNA的MspⅠ/HpaⅡ酶切产物进行Southern杂交,以未作用的细胞DNA同样酶切杂交为对照.通过杂交带谱的变化,分析bcl-2基因的甲基化状况.结果显示:mbcl-2及hbcl-2在5-Fu作用12h后调控区甲基化水平增高,但其编码区甲基化状态皆未出现可检出的变化.上述结果提示:bcl-2基因调控区甲基化水平升高可能与该基因下调有关
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关 键 词: | 细胞凋亡 bcl-2 原癌基因 甲基化 |
收稿时间: | 1998-06-20 |
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