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雌激素通过LRP16基因5′侧翼GC富含区上调其转录的分子机制
引用本文:司艺玲,韩为东,赵亚力,李琦,宋海静,于力,母义明.雌激素通过LRP16基因5′侧翼GC富含区上调其转录的分子机制[J].中国生物化学与分子生物学报,2006,22(8):627-634.
作者姓名:司艺玲  韩为东  赵亚力  李琦  宋海静  于力  母义明
作者单位:1. 解放军总医院基础医学研究所分子生物室,北京,100853
2. 解放军总医院血液科,北京,100853
3. 解放军总医院内分泌科,北京,100853
摘    要:LRP16是一个明确的雌激素(E2)反应性靶基因,已往研究在LRP16基因上游调控区鉴定了一个E2反应性1/2ERE/GC富含的ERα作用位点(-676 bp到-214 bp;命名为A区).为进一步鉴定雌激素上调LRP16基因表达的最大化反应区域,对LRP16基因上游调控区进行缺失突变,通过相对荧光素酶活性分析观察到LRP16基因的一段5′近端侧翼序列(-213 bp到-24 bp;命名为B区)具有明显的E2反应性.通过与A区比较,认为B区最大化的呈递了E2对LRP16基因的转激活效应.序列分析表明,B区缺乏经典的ERE元件,而包含多个富含GC序列.针对Sp1的siRNA实验结果提示,Sp1参与了E2对该区域的转激活.针对GC富含区进一步的缺失突变,及荧光素酶活性分析,识别了一段30 bp(-213 bp到-184 bp)的序列在B区呈递E2反应活性中发挥核心作用.超级凝胶电泳实验结果表明,Sp1蛋白与这段30 bp的DNA序列在体外存在直接结合作用.染色质免疫共沉淀实验结果证实,ERα、Sp1与B区存在E2依赖性相互作用.本文在LRP16的5′侧翼区识别了一段最大化呈递E2活性的DNA片段.机制研究表明,在E2存在条件下,ERα通过Sp1与该区域的直接作用上调LRP16基因的表达.

关 键 词:雌激素  雌激素受体α  LRP16  Sp1  
收稿时间:2006-1-24
修稿时间:2006年1月24日
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