| 人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达 |
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| 引用本文： | 林美珍,蒋梅琴,李水琴,林妍,黄义德.人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达[J].生物工程学报,2016,32(8):1133-1144. |
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| 作者姓名： | 林美珍 蒋梅琴 李水琴 林妍 黄义德 |
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| 作者单位： | 福建师范大学 生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108,福建师范大学 生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108,福建师范大学 生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108,福建师范大学 生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108,福建师范大学 生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福建 福州 350108 |
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| 基金项目： | 福建省教育厅重点项目 (No. JA12061) 资助。 |
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| 摘 要： | 牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达是细胞向成牙本质细胞分化的标志。试图分析人DSPP启动子及构建人DSPP启动子驱动的Lac Z基因表达的报告体系,从而方便快捷检测细胞是否向成牙本质细胞分化。为了建立能表达DSPP的细胞体系,分离了人牙胚间充质细胞,并用地塞米松诱导培养液进行诱导,结果显示,该诱导培养液能有效地诱导人牙胚间充质细胞DSPP基因的表达。利用双荧光素酶报告系统对4段人DSPP基因5′上游区域(-4 000-+54、-2 500-+54、-1 447-+54和-1 027-+54)进行分析,结果显示-2 500-+54区域的启动子活性最高。5′上游区从?2 500 bp延长到?4 000 bp时,启动子活性下降;5′上游区从-2 500 bp缩短至-1 447 bp时,启动子活性下降;再次将-1 447 bp缩短至-1 027 bp时,启动子活性进一步下降。结果暗示在-4 000 bp至-2 500 bp区域存在转录抑制元件,-2 500 bp至-1 027 bp区域存在转录激活元件。用-2 500-+54启动子区域和Lac Z基因构建ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体,并分别在人牙胚间充质细胞和永生化人牙胚间充质细胞系ih EDMC4上检测ph DSPP-Lac Z报告载体的功能,通过X-Gal染色,结果显示在2种细胞牙向分化过程中均可检测到Lac Z基因的表达。研究构建的ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体可为诱导人源细胞牙向分化、牙齿发育、牙齿再生工程等研究中DSPP的表达检测提供一种更加便捷的手段。
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| 关 键 词： | 牙本质涎磷蛋白，启动子，人牙胚间充质细胞，LacZ基因 |
| 收稿时间： | 2015/11/18 0:00:00 |
Expression of the reporter LacZ driven by human dentin sialophosphoprotein promoter in human dental mesenchymal cells |
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| Meizhen Lin,Meiqin Jiang,Shuiqin Li,Yan Lin and Yide Huang.Expression of the reporter LacZ driven by human dentin sialophosphoprotein promoter in human dental mesenchymal cells[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(8):1133-1144. |
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| Authors: | Meizhen Lin Meiqin Jiang Shuiqin Li Yan Lin and Yide Huang |
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| Institution: | Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, Fujian, China,Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, Fujian, China,Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, Fujian, China,Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, Fujian, China and Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350108, Fujian, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dentin sialophosphoprotein (DSPP) promoter human dental mesenchymal cells LacZ gene |
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