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铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与原核表达
引用本文:孟衡玲,杨生超,查应洪,文国松. 铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与原核表达[J]. 西北植物学报, 2013, 33(4): 692-696
作者姓名:孟衡玲  杨生超  查应洪  文国松
作者单位:(1 云南农业大学,云南省中药材规范化种植技术指导中心,昆明 650201;2 红河学院 生命科学与技术学院,云南蒙自 661100;3 云南红河群鑫石斛种植有限公司,云南屏边 661200)
基金项目:云南省重大产业项目[云发改高技(2007)1718号];国家科技支撑计划(2011BAI13B02-5)
摘    要:应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenBank登录号JF423929。该基因编码1 061个氨基酸,与文心兰的SPS基因氨基酸序列的一致性最高为93%,与其他科植物SPS基因的氨基酸序列的一致性均高于60%。(2)原核诱导表达结果显示,SPS基因在大肠杆菌中的重组蛋白分子质量约为118.7kD,其表达与序列分析推测的结论一致。(3)生物信息学分析表明,铁皮石斛SPS基因的二级结构包括了螺旋、β-折叠和无规则卷曲,是非跨膜结构的亲水性不稳定蛋白,有2个功能结构域,分别是蔗糖合成功能域及糖基转移功能域。

关 键 词:铁皮石斛  蔗糖磷酸合成酶  基因克隆  原核表达

Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Sucrose Phosphate Synthase Gene from Dendrobium officinale
MENG Hengling,YANG Shengchao,ZHA Yinghong,WEN Guosong. Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Sucrose Phosphate Synthase Gene from Dendrobium officinale[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2013, 33(4): 692-696
Authors:MENG Hengling  YANG Shengchao  ZHA Yinghong  WEN Guosong
Affiliation:1(1 Yunnan Agricultural University,Yunnan Provincial Good Agricultural Practice Center of Chinese Medical Materials,Kunming 650201,China;2 Faculty of Science and Biotechnology,Honghe College,Mengzi,Yunnan 661100,China;3 Yunnan Honghe Qunxin Dendrobium Planting Co.,Ltd,Pingbian,Yunnan 661200,China)
Abstract:
Keywords:Dendrobium officinale  sucrose phosphate synthase  gene cloning  prokaryotic expression
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