| NGAL基因新型TPA反应元件结合蛋白的研究 |
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| 引用本文： | 孟令英,缪成贵,杜则澎,蔡唯佳,许丽艳,李恩民.NGAL基因新型TPA反应元件结合蛋白的研究[J].生物化学与生物物理进展,2008,35(6):661-670. |
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| 作者姓名： | 孟令英 缪成贵 杜则澎 蔡唯佳 许丽艳 李恩民 |
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| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515041
2. 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515041 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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国家自然科学基金
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广东省自然科学基金
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教育部高等学校博士点重点学科专项基金 |
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| 摘 要： | 以往研究发现,食管癌细胞的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因的过表达具有明显的12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(12-O-tetradecanoyl phorboi-13-acetate,TPA)诱导性,在启动子-152～-60 区段存在着一种新型的TPA反应元件(TPA response element,TRE),但是该元件的结合蛋白尚未被鉴定出来.采用寡核苷酸DNA亲和层析法(oligonucleotide trapping)从食管癌细胞中分离纯化了NGAL基因TRE结合蛋白;经SDS-PAGE进一步分离,银染显示目标蛋白带.人工切取各目标蛋白带进行MALDI-TOF-MS分析,通过Mascot软件搜索NCBI数据库,根据蛋白质的功能、细胞定位和分子质量大小等指标确定8个核蛋白因子:C19、KIAA1949、TDRD1、RXRβ、FAM54A、KLF15、KLF10和YY-1.最后,利用RT-PCR验证了这些核蛋白因子表达的TPA反应性,结果表明C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β和KLF15等编码基因的转录表现出了明显的TPA反应性,提示可能是食管癌细胞中应答TPA刺激,参与NGAL基因过表达的转录激活因子.
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| 关 键 词： | NGAL基因 寡核苷酸DNA亲和层析 MALDI-TOF-MS TPA反应元件 TPA反应元件结合蛋白 TPA反应性 NGAL 基因过表达 反应元件结合蛋白 研究 Gene Binding Proteins Element Response 转录激活因子 刺激 表现 编码基因 结果 反应性 因子表达 核蛋白因子 验证 利用 指标确定 大小 |
| 收稿时间： | 2007/10/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2007年10月25 |
Study of New TPA Response Element Binding Proteins of NGAL Gene |
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| MENG Ling-Ying,MIAO Cheng-Gui,DU Zeng-Peng,CAI Wei-Ji,XU Li-Yan and LI En-Min.Study of New TPA Response Element Binding Proteins of NGAL Gene[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2008,35(6):661-670. |
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| Authors: | MENG Ling-Ying MIAO Cheng-Gui DU Zeng-Peng CAI Wei-Ji XU Li-Yan and LI En-Min |
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| Institution: | Department of Oncologic Pathology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China;Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China;Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China;Department of Oncologic Pathology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China;Department of Oncologic Pathology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China;Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical College of Shantou University, Shantou 515041, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NGAL gene oligonucleotide trapping DNA affinity chromatograph MALDI-TOF-MS TPA response element TPA response element binding proteins TPA responsiveness |
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