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一个约30kD膜蛋白作为汉坦病毒候选受体的筛选
引用本文:李青岭,冯涛,郭进军,黄爱龙.一个约30kD膜蛋白作为汉坦病毒候选受体的筛选[J].生物技术通报,2008(4).
作者姓名:李青岭  冯涛  郭进军  黄爱龙
作者单位:1. 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,重庆400016
2. 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016
3. 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学附属第二医院消化内科,重庆,400016
4. 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016
基金项目:国家自然科学基金项目"汉坦病毒胞膜糖蛋白受体或受体辅助分子的分离鉴定研究"资助
摘    要:目的:筛选汉坦病毒包膜糖蛋白G2可能的候选受体或受体辅助分子,方法:根据汉坦病毒76~118株M基因序列设计引物,PCR扩增和基因重组获得G2全长及各功能片段的GST融合表达质粒,SDS-PAGE检测它们在BL21菌中诱导表达及纯化的效果.生物素标记汉坦病毒易感细胞Vero E6和非允许细胞CHO的细胞膜蛋白.将在BL21裂解上清中有表达的G2蛋白N端81~140位氨基酸片段(G2N81-140)纯化后与含有生物素标记的Vero E6细胞膜裂解液进行孵育,同时以非允许细胞CHO和无关蛋白GST-TLM做为阴性对照.通过GST Pull-down分离与G2蛋白特异性结合的细胞膜蛋白.结果:一个约30kD的Vero E6细胞膜蛋白与G2N81-140片段之间存在着特异性的相互作用.结论:该30kD蛋白可能是汉坦病毒细胞膜候选受体或受体辅助分子之一,是病毒入侵细胞的一个相关分子.

关 键 词:汉坦病毒受体  包膜糖蛋白G2  GST  Pull-down  生物素膜标记

A 30kD Surface Protein was Screened as a Candidate Receptor of Hantavirus 76~118 Strain
Abstract:
Keywords:
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