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利用慢病毒载体观察microRNA-194 对人骨肉瘤细胞系U2-OS 生物学特性的影响
引用本文:韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫,肖春 沙浩 董川 杨彤涛 周勇 马保安.利用慢病毒载体观察microRNA-194 对人骨肉瘤细胞系U2-OS 生物学特性的影响[J].现代生物医学进展,2014,14(23):4401-4405.
作者姓名:韩康 赵廷宝 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫  肖春 沙浩 董川 杨彤涛 周勇 马保安
作者单位:第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所;济南军区总医院脊髓修复科
基金项目:国家自然科学基金项目(81201633)
摘    要:目的:通过构建携带针对microRNA-194 的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS,改变细胞 内microRNA-194 基因的表达水平,研究microRNA-194 对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤 生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法:PCR扩增pri-miR-194 及miR-194-5 成熟体,克隆于慢病毒载体plent-i GFP 中,转 染大肠杆菌感受态细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS。进行MTT,流式,平板克隆等试验。结果:1.重组慢 病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5× 108 TU/ml及4× 108 TU/ml;2. microRNA-194过表 达的人骨肉瘤细胞系U2-OS 细胞增殖速度,凋亡率及细胞周期相较于其它实验组都有明显变化(P<0.01)。结论:成功构建了 microRNA-194 过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194 的表达水平对U2-OS 细胞的增殖和凋亡造成显著影响。 microRNA-194 可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。

关 键 词:microRNA-194  慢病毒  骨肉瘤  细胞增殖  细胞凋亡

Effects of MicroRNA-194 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cell Line U2-OS by Using Recombinant Lentivirus Vector
HAN Kang,ZHAO Ting-bao,BIAN N,CAI Cheng-kui,YAN Shi-ju,WANG Xin,XIAO Chun,SHA Hao,DONG Chuan,YANG Tong-tao,ZHOU Yong,MA Bao-an.Effects of MicroRNA-194 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cell Line U2-OS by Using Recombinant Lentivirus Vector[J].Progress in Modern Biomedicine,2014,14(23):4401-4405.
Authors:HAN Kang  ZHAO Ting-bao  BIAN N  CAI Cheng-kui  YAN Shi-ju  WANG Xin  XIAO Chun  SHA Hao  DONG Chuan  YANG Tong-tao  ZHOU Yong  MA Bao-an
Abstract:
Keywords:MicroRNA-194  Lentivirus  Osteosarcoma  Cell proliferation  Cell apoptosis
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