| PRAS40与14-3-3蛋白各亚型相互作用的酵母双杂交系统检测 |
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| 引用本文： | 刘康武,黄蓓,谭阳,吴东明.PRAS40与14-3-3蛋白各亚型相互作用的酵母双杂交系统检测[J].生物工程学报,2007,23(4):652-656. |
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| 作者姓名： | 刘康武 黄蓓 谭阳 吴东明 |
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| 作者单位： | 安徽大学生命科学学院,合肥,230039 |
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| 基金项目： | 安徽省教育厅科研项目;安徽省生态工程与生物技术重点实验室开放课题 |
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| 摘 要： | PRAS40是近几年新发现的Akt作用底物,14-3-3结合蛋白。为确定PRAS40与14-3-3蛋白7种亚基间相互作用关系,利用gateway方法构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒pEG-PRAS40及转录激活质粒pJG-PRAS40,将PRAS40和14-3-3各亚型质粒分别作为诱饵蛋白质粒及转录激活质粒共转化酵母细胞EGY48,通过氨基酸营养缺陷生长实验及β-半乳糖苷酶显色反应分析两种蛋白相互作用程度。酶切鉴定证实成功地构建了pEG-PRAS40和pJG-PRAS40质粒,酵母双杂交实验结果显示PRAS40可以和14-3-3亚型tau,beta,zeta及epsilon相结合,epsilon较强,beta和zeta次之,tau较弱。此结果将为深入研究PRAS40与14-3-3蛋白生物学功能及发现药物靶标奠定基础。
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| 关 键 词： | gateway技术 酵母双杂交 |
| 文章编号： | 1000-3061（2007）04-0652-05 |
| 修稿时间： | 2006-12-25 |
Study of Interaction Between PRAS40 and 14-3-3 Proteins by Using Yeast Two-hybrid System |
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| LIU Kang-Wu,HUANG Bei,TAN Yang and WU Dong-Ming.Study of Interaction Between PRAS40 and 14-3-3 Proteins by Using Yeast Two-hybrid System[J].Chinese Journal of Biotechnology,2007,23(4):652-656. |
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| Authors: | LIU Kang-Wu HUANG Bei TAN Yang and WU Dong-Ming |
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| Institution: | School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230039, China;School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230039, China;School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230039, China;School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230039, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PRAS40 14-3-3 |
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