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人突触相关蛋白抗原表位分析、抗体制备及表达研究
引用本文:杨向东,王仁,刘俊文,屈顺林,郭芳,王蕾,盛树力.人突触相关蛋白抗原表位分析、抗体制备及表达研究[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(12):1119-1124.
作者姓名:杨向东  王仁  刘俊文  屈顺林  郭芳  王蕾  盛树力
作者单位:南华大学心血管病研究所,衡阳,421001
基金项目:国家自然科学基金(30200103)和湖南省教育厅青年基金(02B039)资助项目.
摘    要:突触相关蛋白家族成员的功能与神经突触膜上的谷氨酸酯受体和钾离子通道的定位和功能有关,参与神经递质的释放、神经的生长、发育及修复.为分析一个新的人突触相关蛋白基因(FRG4)的抗原表位和该蛋白质在血管细胞的表达,从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列.通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇和功能结构域;选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,免疫新西兰白兔获得兔抗人FRG4多抗;免疫组化检测该蛋白质在人血管细胞中的表达.高效液相色谱检测显示制备的兔抗人FRG4多克隆抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16 000,蛋白质印迹证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实,其主要在平滑肌细胞和内皮细胞的胞浆中表达.结果表明,成功制备了兔抗人FRG4抗体,FRG4蛋白主要在细胞胞浆中表达,与生物信息学分析结果一致.

关 键 词:动脉粥样硬化,巨噬细胞,突触相关蛋白,多肽合成,生物信息学
收稿时间:2004/7/12 0:00:00
修稿时间:2004/9/30 0:00:00

Epitope Analysis of a Novel Homo Spains Synapse Associated Protein and Preparation of Antibody and Expression Research
YANG Xiang-Dong,WANG Ren,LIU Jun-Wen,QU Shun-Lin,GUO Fang,WANG Lei and SHENG Shu-Li.Epitope Analysis of a Novel Homo Spains Synapse Associated Protein and Preparation of Antibody and Expression Research[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2004,31(12):1119-1124.
Authors:YANG Xiang-Dong  WANG Ren  LIU Jun-Wen  QU Shun-Lin  GUO Fang  WANG Lei and SHENG Shu-Li
Institution:Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China;Institute of Cardiovascular Disease , Nanhua University, Hengyang 421001, China
Abstract:
Keywords:atherosclerosis  macrophages  synapse-associated protein  peptide synthesis  bioinformatic analysis
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