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不同因素对人Ⅹ型磷脂酶A2 包涵体重折叠的影响
引用本文:程洪强,张 琛,胡红雨,许根俊.不同因素对人Ⅹ型磷脂酶A2 包涵体重折叠的影响[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(2):154-160.
作者姓名:程洪强  张 琛  胡红雨  许根俊
作者单位:1. 中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,中国科学院研究生院,上海,200031
2. 中国科学院上海生命科学研究院,生物化学与细胞生物学研究所,中国科学院研究生院,上海,200031;浙江理工大学生命科学学院,杭州,310033
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39930060)
摘    要:人 Ⅹ型磷脂酶 A2 在大肠杆菌中的表达产物完全以不溶的包涵体形式存在 . 用以前适用于人胰型 (IB 型 ) 磷脂酶 A2 的稀释重折叠方法,并不能使它有效重折叠 . 以初步纯化的包涵体为对象,发现溶液的温度、 pH 值和蛋白质浓度对 Ⅹ 型磷脂酶 A2 体外重折叠有很大的影响 . 研究了一些小分子化合物对 Ⅹ 型磷脂酶 A2 ,在高蛋白质浓度 (1 g/L) 下重折叠的影响,发现 1 mol/L 的 L- 精氨酸能提高其重折叠效率达 6 倍多 . L- 精氨酸的结构类似物 L- 瓜氨酸对 Ⅹ 型磷脂酶 A2 的重折叠有较弱的改善,而 L- 赖氨酸和 L- 精氨酸甲基酯则降低了 Ⅹ 型磷脂酶 A2 的活性恢复 . 结果表明 , L- 精氨酸对蛋白质重折叠的帮助作用,可能是通过精氨酸与折叠中间物的结合产生的,精氨酸的胍基和羧基都是必需的,其侧链胍基以其特殊的带电方式阻遏了重折叠过程中的积聚和分子间二硫键形成的反应 .

关 键 词:人Ⅹ  型磷脂酶  A2  ,包涵体,重折叠,  L-  精氨酸

Effects on Human Group X Phospholipase A2 Inclusion Bodies Folding
CHENG Hong-Qiang,ZHANG Chen,HU Hong-Yu and XU Gen-Jun.Effects on Human Group X Phospholipase A2 Inclusion Bodies Folding[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2005,32(2):154-160.
Authors:CHENG Hong-Qiang  ZHANG Chen  HU Hong-Yu and XU Gen-Jun
Institution:Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, The Chinese Academy of Sciences,Graduate School of The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China;Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, The Chinese Academy of Sciences,Graduate School of The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China;Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, The Chinese Academy of Sciences,Graduate School of The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China;College of Life Science, Zhejiang University of Sciences, Hangzhou 310033, China
Abstract:
Keywords:
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