红曲霉葡萄糖淀粉酶的研究II．进一步提纯及其性质

红曲霉(Monascus sp．) AS 3．2199的葡萄糖淀粉酶(E．C．3．2．1．3)的凝肢电泳图谱表现为5个带。过去曲经提纯得到过以带3和带4为主的制品。结晶的样品仍具有两个带。现将DEAE一纤维素柱层析的条件加以改变，即以0．01M、pH5.8的吡啶一盐酸缓冲液及NaCl浓度梯度(0—0．2M)洗脱，可以得到以带4为主的制品，经在同样条件下再层析即得到凝歧电泳均一的纯带q样品。纯酶作用的最适条件为pH4.5，温度50—55℃。耐热性较差，在55℃保温5小时后，酶活力仅存13％。酶作用于可溶性淀粉的米氏常数K。为1．05×10-4(克／毫 升)。Ag+、Fe++、8-羟基喹啉和碘乙酸对酶有抑制作用。用等电聚焦法测定出来的等电点pI为4．04(5—7℃)。紫外吸收光谱最高吸收值在282毫微米，最低吸收值在252毫微米。超离心沉降分析表现为均一样品，样品浓度为10毫克／毫升时测得的沉降?占数sw，20为5．55s，浓度0．27毫克／毫升时，测得的Sw，20为4．8S。用凝胶过滤法在Sephadcx G 100柱上测出分子量为55，000。