| 拟南芥RPS14基因的克隆表达及功能初步研究 |
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| 引用本文： | 范艳荣,刘莹,张飞云.拟南芥RPS14基因的克隆表达及功能初步研究[J].生物技术通报,2013(1):73-77. |
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| 作者姓名： | 范艳荣 刘莹 张飞云 |
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| 作者单位： | 首都师范大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31071075) |
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| 摘 要： | 拟南芥RPS14(Ribosomal protein S14)是从拟南芥中分离出的一种核糖体蛋白,是核糖体40S亚基的组成成分,属于S11P核糖体蛋白家族,主要负责RNA转录后加工。提取拟南芥总RNA,用RT-PCR技术得到RPS14全长基因,经T-A克隆插入到pEASY-T3载体上。利用亚克隆法成功构建pGEX-6P-1-RPS14原核表达质粒。GST-RPS14融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,分子量约为43 kD。运用同样方法构建pET-28a-AK6原核表达质粒,获得大小约为26 kD的HIS-AK6融合蛋白。运用体外pull-down技术,并用SDS-PAGE和Western blot进行验证,证明拟南芥RPS14蛋白与AK6蛋白之间存在相互作用。因此,推测拟南芥的AK6与RPS14蛋白共同参与核酸代谢过程,影响RNA转录后加工,进而抑制拟南芥茎细胞的生长,使植株表现矮小特征。
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| 关 键 词： | 拟南芥 RPS14 AK6 Pull-down |
Cloning,Expression and Function Preliminary Research of RPS14 in Arabidopsis thaliana |
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| Fan Yanrong Liu Ying Zhang Feiyun.Cloning,Expression and Function Preliminary Research of RPS14 in Arabidopsis thaliana[J].Biotechnology Bulletin,2013(1):73-77. |
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| Authors: | Fan Yanrong Liu Ying Zhang Feiyun |
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| Institution: | Fan Yanrong Liu Ying Zhang Feiyun(College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100048) |
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