HCMV IE86蛋白与转录激活因子的相互作用 |
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引用本文: | 徐进平,叶林柏.HCMV IE86蛋白与转录激活因子的相互作用[J].中国科学C辑,2002,32(3):232-239. |
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作者姓名: | 徐进平 叶林柏 |
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作者单位: | 武汉大学病毒研究所,武汉,430072 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(批准号: 39570160) |
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摘 要: | 将人巨细胞病毒IE86 cDNA克隆入pGEX-2T表达载体, 在大肠杆菌中表达出GST-IE86融合蛋白. SDS-PAGE和Western blot分析表明, GST-IE86融合蛋白存在于细胞裂解上清中, 为可溶性蛋白, 分子量为92 ku. 通过亲和层析柱纯化, 分别获得纯化的GST和GST-IE86融合蛋白. 采用特异性亲和层析共分离技术研究HCMV IE86 蛋白与转录调控蛋白及转录因子相互作用, 表明IE86能与直接结合启动子DNA的转录激活因子SP1, AP1, AP2及转录因子TFⅡB相互作用而形成异源蛋白复合物. 该转录激活因子及转录因子与IE86蛋白同时被吸留在亲和层析柱中, 但IE86蛋白不能与NF-κB相互作用. 提示IE86蛋白与转录激活因子及转录因子相互作用的活性与IE86蛋白的糖基化无关;IE86蛋白激活多种基因转录是由于IE86蛋白具有两个蛋白质结合位点, 它们与激活转录的调控蛋白和转录因子结合, 这种相互作用加速了转录起始复合物的装配.
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关 键 词: | IE86 蛋白质 相互作用 人巨细胞病毒 |
收稿时间: | 2001-07-03 |
修稿时间: | 2001年7月3日 |
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