| 生防菌密旋链霉菌Act12中SPA7074缺失突变株的构建及其次级代谢产物鉴定 |
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| 作者姓名： | 段雪梅 赵飞扬 颜霞 薛泉宏 李晓霞 文冰洁 贾良辉 颜华 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学资源环境学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100 |
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| 基金项目： | 陕西省农业科技创新与攻关（2015NY066）;上海交通大学微生物代谢国家重点实验室开放基金（MMLKF14-09）;中央高校基本科研业务费（Z109021426,Z109021432）;高校博士点基金（20120204120034,20120204120042） |
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| 摘 要： | 【目的】通过基因工程手段构建生防菌Act12转录调控因子SPA7074缺失突变株,并挖掘其中活性次级代谢产物资源和探讨其活性机理。【方法】利用同源重组方法敲除Act12基因组中可能的Tet R家族转录调控因子编码基因spa7074(accession number:KU955325),平板实验检测缺失突变株发酵液抑菌活性的变化,并通过HPLC比较代谢图谱,然后通过质谱及核磁共振对差异峰对应化合物进行结构鉴定。【结果】SPA7074缺失突变株对几种病原真菌的拮抗活性显著增强,比较代谢图谱表明出现数个差异峰,将最显著差异峰所对应化合物进行分离纯化鉴定,结果为寡霉素D。【结论】本研究通过基因工程手段敲除生防菌株Act12中的负转录调控转录因子,使得突变菌株抑菌活性显著增强,并获得了产量达野生型菌株7倍的寡霉素D高产菌株Δspa7074。
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| 关 键 词： | 生防菌 密旋链霉菌Act12 TetR家族 基因中断 寡霉素D |
| 收稿时间： | 2016-03-31 |
| 修稿时间： | 2016-05-13 |
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