抗人黑色素瘤单链抗体基因在大肠杆菌中的融合表达

应用RT-PCR技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞HB8760中克隆了抗体轻、重链可变区基因，用(Gly₄Ser)₃连接肽基因将V_H、V_L连接成ScFv基因，并进行了序列测定。ScFv基因全长927bp，其中VH基因长360bp，编码120个氨基酸，V_L基因长324bp，编码108个氨基酸。在大肠杆菌融合表达载体pGEX-4T-1中表达了GST-ScFv融合蛋白，表达产量占菌体总蛋白的29%。凝血酶消化后的产物具有黑色素瘤细胞结合活性。