| 中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22的克隆与功能研究 |
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| 引用本文： | 廖卫芳,赵盛英,付春华,刘志国,缪礼鸿,赵春芳,余龙江.中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22的克隆与功能研究[J].植物科学学报,1983,37(3):367-373. |
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| 作者姓名： | 廖卫芳 赵盛英 付春华 刘志国 缪礼鸿 赵春芳 余龙江 |
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| 作者单位： | 1. 武汉轻工大学生物与制药工程学院, 武汉 430023;
2. 华中科技大学生命科学与技术学院, 武汉 430074 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金（20120142130009）；华中科技大学校自主创新基金（2013TS079）。 |
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| 摘 要： | 基于中国红豆杉（Taxus wallichiana var.chinensis（Pilger） Florin）转录组序列，从中扩增到1个新的P450羟化酶基因TcCYP725A22，并对其进行了克隆、表达及功能分析。生物信息学分析结果显示：该基因编码区长1500 bp，共编码499个氨基酸；编码蛋白无信号肽，包含1个跨膜区，具有催化活性中心结构域。进一步将该基因在酿酒酵母WAT11中进行异源表达功能研究，蛋白质免疫印迹（Western blot）实验结果表明，目的蛋白TcCYP725A22可在WAT11中成功表达；液相色谱-质谱联用（LC-MS）分析结果显示，羟化酶TcCYP725A22对底物紫杉素表现出催化活性。依据质谱结果及反应底物紫杉素的分子结构，判断其催化产物可能为添加了2个羟基的紫杉烷新衍生物。
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| 关 键 词： | 紫杉醇 生物合成途径 羟化酶 红豆杉 基因功能分析 |
Cloning and functional analysis of hydroxylase gene TcCYP725A22 from Taxus wallichiana var.chinensis |
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| Liao Wei-Fang,Zhao Sheng-Ying,Fu Chun-Hua,Liu Zhi-Guo,Miao Li-Hong,Zhao Chun-Fang,Yu Long-Jiang.Cloning and functional analysis of hydroxylase gene TcCYP725A22 from Taxus wallichiana var.chinensis[J].Plant Science Journal,1983,37(3):367-373. |
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| Authors: | Liao Wei-Fang Zhao Sheng-Ying Fu Chun-Hua Liu Zhi-Guo Miao Li-Hong Zhao Chun-Fang Yu Long-Jiang |
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| Institution: | 1. School of Biology and Pharmaceutical Engineering, Wuhan Polytechnic University, Wuhan 430023, China;
2. School of Life Science and Technology, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430074, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Taxol Biosynthetic pathway Hydroxylase Taxus wallichiana var chinensis Gene functional analysis |
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