一株家蚕异型微孢子虫感染特征和分类地位

【背景】家蚕微粒子病是一种对蚕业生产危害巨大的蚕病，该病病原是蚕种生产唯一检疫对象，而家蚕病原性微孢子虫种类多、来源复杂，给蚕种生产微粒子病的防控增加了难度。【目的】研究一株从蚕种检疫样品中分离的微孢子虫(命名为GXM15)的致病性和分类地位，鉴定并分析其来源，完善家蚕病原性微孢子虫分类和数据库，为蚕种生产控制家蚕微粒子病提供参考依据。【方法】采用生物试验方法测定GXM15微孢子虫对家蚕的半数感染浓度(IC50)和胚种传染率；显微镜观察GXM15微孢子虫孢子形态，利用透射电子显微镜观察GXM15微孢子虫的超微结构；采用PCR扩增、T克隆和测序获得GXM15微孢子虫的SSU rRNA基因和ITS片段DNA序列，并利用MEGA 5.0和DNAstar软件构建GXM15微孢子虫的系统发育树和遗传距离分析。【结果】GXM15微孢子虫对家蚕的IC50为8.29×104个/mL，是家蚕微孢子虫(Nosema bombycis，Nb)的2.28倍；GXM15微孢子虫对家蚕的胚种传染率为3.6%，明显低于Nb；GXM15微孢子虫形态呈短卵圆形，大小为(2.05±0.20)× (3.25±0.30) μm，GXM15微孢子虫体积是Nb微孢子虫的2.19倍；GXM15微孢子虫超微结构具双核，极丝13圈，极丝倾斜角约45°，符合Nosema属的特征；GXM15微孢子虫SSU rRNA基因在系统发育树中位于Nosema属分支中，遗传距离分析表明GXM15微孢子虫与Nb同属异种，是一株新微孢子虫。【结论】GXM15微孢子虫是一株家蚕病原性微孢子虫，根据GXM15微孢子虫致病性和分类地位研究，可以为蚕种生产防控家蚕微粒子病提供参考依据。

Infection characteristics and classification of a microsporidian isolated from silkworm