| 异源表达德氏乳杆菌保加利亚亚种TCS1调控酸适应基因提高乳酸乳球菌NZ9000耐酸性 |
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| 引用本文： | 王超,崔艳华,曲晓军.异源表达德氏乳杆菌保加利亚亚种TCS1调控酸适应基因提高乳酸乳球菌NZ9000耐酸性[J].微生物学报,2020,60(11):2521-2537. |
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| 作者姓名： | 王超 崔艳华 曲晓军 |
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| 作者单位： | 哈尔滨工业大学化工与化学学院, 黑龙江 哈尔滨 150090;黑龙江省科学院微生物研究所, 黑龙江 哈尔滨 150010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31371827，31471712） |
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| 摘 要： | 目的] 在乳酸乳球菌NZ9000中异源表达德氏乳杆菌保加利亚亚种中由双组分系统TCS1（JN675228/JN675229）调控的与酸适应相关基因，进而探究德氏乳杆菌保加利亚亚种应对酸胁迫的机制。方法] 通过逆转录聚合酶链式反应和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证由德氏乳杆菌保加利亚亚种TCS1调控的与酸适应相关基因中腺嘌呤磷酸核糖转移酶（aprt）、D-丙氨酸-D-丙氨酸连接酶（ddl）、寡肽ABC转运蛋白（oppDII）和延伸因子Ts（tsf）在乳酸乳球菌NZ9000中的表达情况。酸处理实验验证基因表达对宿主菌酸胁迫耐受能力的影响。并采用酵母双杂交验证双组分系统TCS1与表达的酸适应相关基因之间的互作关系及具体的互作部位。结果] 结果表明，乳酸乳球菌NZ9000中成功表达了aprt、ddl、oppDII和tsf。aprt、ddl基因使重组菌对酸胁迫的抗性分别提高了75倍和114倍。oppDII和tsf基因的表达对重组菌株的耐酸能力没有明显影响。酵母双杂交实验表明TCS1中的组氨酸蛋白激酶HPK1与Ddl之间存在相互作用，且HPK1-C结构域是二者相互作用的关键区域。结论] aprt和ddl过表达菌株酸刺激的适应能力显著高于对照菌株，该研究结果可为德氏乳杆菌保加利亚亚种及类似菌株耐酸性特性的获得策略提供参考。
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| 关 键 词： | 德氏乳杆菌保加利亚亚种 腺嘌呤磷酸核糖转移酶 D-丙氨酸-D-丙氨酸连接酶 耐酸性 酵母双杂交 |
| 收稿时间： | 2020/2/11 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/5/19 0:00:00 |
Expression of genes regulated by acid adaptation related TCS1 of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus improved acid tolerance of Lactococcus lactis subsp. cremoris NZ9000 |
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| Chao Wang,Yanhua Cui,Xiaojun Qu.Expression of genes regulated by acid adaptation related TCS1 of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus improved acid tolerance of Lactococcus lactis subsp. cremoris NZ9000[J].Acta Microbiologica Sinica,2020,60(11):2521-2537. |
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| Authors: | Chao Wang Yanhua Cui Xiaojun Qu |
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| Institution: | School of Chemistry and Chemical Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, Heilongjiang Province, China; Institute of Microbiology, Heilongjiang Academy of Sciences, Harbin 150010, Heilongjiang Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus adenine phosphoribosyltransferase D-alanine-D-alanine ligase acid tolerance yeast two-hybrid |
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