| 基于16S rDNA基因的谷斑皮蠹PCR检测技术 |
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| 引用本文： | 张祥林,李京,罗明,李亚伟,王翀,张小菊.基于16S rDNA基因的谷斑皮蠹PCR检测技术[J].生物安全学报,2017,26(1):75-79. |
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| 作者姓名： | 张祥林 李京 罗明 李亚伟 王翀 张小菊 |
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| 作者单位： | 新疆出入境检验检疫局, 新疆 乌鲁木齐 830063,新疆出入境检验检疫局, 新疆 乌鲁木齐 830063;新疆农业大学农学院, 新疆 乌鲁木齐 830052,新疆农业大学农学院, 新疆 乌鲁木齐 830052,新疆出入境检验检疫局, 新疆 乌鲁木齐 830063,新疆出入境检验检疫局, 新疆 乌鲁木齐 830063,新疆出入境检验检疫局, 新疆 乌鲁木齐 830063 |
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| 基金项目： | 国家质检公益性行业科研专项（201310091） |
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| 摘 要： | 【目的】谷斑皮蠹是一种重要的检疫性害虫,在新疆周边多个国家分布,口岸检疫人员多次从进境货物中截获谷斑皮蠹,该虫对新疆的农业生产极具威胁。【方法】以谷斑皮蠹的16S rDNA基因为靶序列,用昆虫通用引物对4种供试皮蠹进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,用生物软件设计检测谷斑皮蠹的特异性引物与探针。【结果】设计的特异性引物(TG-SNP-F/TG-SNP-R)及所建立的常规PCR方法能有效检测出谷斑皮蠹,其扩增产物的片段大小为250 bp,灵敏度为3 ng·μL~(-1)。设计的特异性引物(TG-F/TG-R)和探针(TG-probe),以及所建立的实时荧光PCR方法,对谷斑皮蠹的检测特异性强,灵敏度达0.8 fg·μL~(-1)。【结论】建立的常规PCR方法和实时荧光PCR检测方法能够对谷斑皮蠹进行准确鉴定,为口岸检疫人员检测进境货物中携带的谷斑皮蠹提供技术支持。
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| 关 键 词： | 谷斑皮蠹 16S rDNA 常规PCR 实时荧光PCR |
| 收稿时间： | 2016/9/2 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2016/11/7 0:00:00 |
Study on molecular detection technology of Trogoderma granarium based on 16S rDNA |
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| ZHANG Xianglin,LI Jing,LUO Ming,LI Yawei,WANG Chong and ZHANG Xiaoju.Study on molecular detection technology of Trogoderma granarium based on 16S rDNA[J].Journal of Biosafety,2017,26(1):75-79. |
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| Authors: | ZHANG Xianglin LI Jing LUO Ming LI Yawei WANG Chong and ZHANG Xiaoju |
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| Institution: | Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Urumqi, Xinjiang 830063, China,Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Urumqi, Xinjiang 830063, China;College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China,College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China,Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Urumqi, Xinjiang 830063, China,Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Urumqi, Xinjiang 830063, China and Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Urumqi, Xinjiang 830063, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trogoderma granarium 16S rDNA conventional PCR real-time PCR |
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