奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定 |
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引用本文: | 李学仁,王海震,葛菲菲,王旭东,曹瑞兵,陈溥言.奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定[J].中国病毒学,2004,19(4):356-359. |
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作者姓名: | 李学仁 王海震 葛菲菲 王旭东 曹瑞兵 陈溥言 |
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作者单位: | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏南京,210095 |
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摘 要: | 经刀豆素(conA)刺激诱导奶牛外周血淋巴细胞,应用RT-PCR方法从其总RNA中对奶牛γ干扰素基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%.然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经SDS-PAGE分析,原核表达产物为16kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的42%,表达产物以包涵体形式存在.经7mol/L盐酸胍的变性液溶解及0.5mol/L盐酸胍复性液处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化,细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为6.0×105U/mg.
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关 键 词: | 奶牛 γ-干扰素基因 原核表达 活性测定 |
文章编号: | 1003-5125(2004)04-0356-04 |
修稿时间: | 2003年12月15 |
Expression and Activity Determination of Bovine Interferon-gamma Gene |
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Abstract: | |
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