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奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定
引用本文:李学仁,王海震,葛菲菲,王旭东,曹瑞兵,陈溥言.奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定[J].中国病毒学,2004,19(4):356-359.
作者姓名:李学仁  王海震  葛菲菲  王旭东  曹瑞兵  陈溥言
作者单位:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏南京,210095
摘    要:经刀豆素(conA)刺激诱导奶牛外周血淋巴细胞,应用RT-PCR方法从其总RNA中对奶牛γ干扰素基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%.然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经SDS-PAGE分析,原核表达产物为16kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的42%,表达产物以包涵体形式存在.经7mol/L盐酸胍的变性液溶解及0.5mol/L盐酸胍复性液处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化,细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为6.0×105U/mg.

关 键 词:奶牛  γ-干扰素基因  原核表达  活性测定
文章编号:1003-5125(2004)04-0356-04
修稿时间:2003年12月15

Expression and Activity Determination of Bovine Interferon-gamma Gene
Abstract:
Keywords:
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