| 抗HBsAg二硫键稳定性Fv抗体(dsFv)基因的构建与表达 |
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| 引用本文： | 宋宏彬,毛春生,陈薇,杜勇,徐德忠,王海涛. 抗HBsAg二硫键稳定性Fv抗体(dsFv)基因的构建与表达[J]. 中国病毒学, 1999, 14(1) |
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| 作者姓名： | 宋宏彬 毛春生 陈薇 杜勇 徐德忠 王海涛 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学流行病学教研室,西安,710032
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 采用PCR定点突变方法,成功地构建了抗HBsAg dsFv抗体的轻、重链突变基因,NdeI和EcoRI酶切后分别插入pET20b表达质粒,经测序证明在重链第44位氨基酸和轻链第100位氨基酸已突变形成半胱氨酸(Cys).VH和VL重组质粒分别转化到大肠肝菌BL21(DE3)中,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳表明在12kD处有包含体蛋白表达,表达蛋白含量分别为28%和35%.VH和VL包含体蛋白经GuHCl变性后,等量混合在复性折叠液中结合,形成了一个约24kD并有一定活性的dsFv蛋白.抗HBsAg dsFv抗体表达及复性的成功,为今后基因工程抗体的研究及应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | dsFv抗体 PCR 定点突变 表达 |
Construction, Expression and Folding of dsFv Mutated Gene of Human Antibody to HBsAg |
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| Song Hongbin,Mao Chunsheng,Chen Wei,Du Yong,Xu Dezhong,Wang Haitao. Construction, Expression and Folding of dsFv Mutated Gene of Human Antibody to HBsAg[J]. Virologica Sinica, 1999, 14(1) |
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| Authors: | Song Hongbin Mao Chunsheng Chen Wei Du Yong Xu Dezhong Wang Haitao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HBsAg |
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