| 两种人源化单链抗体-尿激酶融合基因的构建与表达 |
| |
| 引用本文： | 刘志刚 俞炜源 王翔. 两种人源化单链抗体-尿激酶融合基因的构建与表达[J]. 生物工程学报, 2000, 16(4): 514-516 |
| |
| 作者姓名： | 刘志刚 俞炜源 王翔 |
| |
| 作者单位： | 刘志刚（军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071）;俞炜源（军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071）;王翔（军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071） |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目(102-09-03-01)。 |
| |
| 摘 要： | Ｓｃｕ ＰＡ 32Ｋ是单链尿激酶 (Ｓｃｕ ＰＡ)分子的Ｎ端肽段被水解后的产物 ,其分子量小但具有与Ｓｃｕ ＰＡ相同的体内外生物活性[1] 。在过去的工作中 ,本实验室利用噬菌体表面呈现技术筛选到 1株对人纤维蛋白特异的鼠源单链抗体[2 ] ,并构建了鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体—Ｓｃｕ ＰＡ 32Ｋ融合基因。为解决该融合基因在大肠杆菌中的高表达问题 ,通过在大肠杆菌中表达构建的一系列融合基因的缺失突变体 ,初步认定Ｓｃｕ ＰＡ 32Ｋ基因中两个连排的大肠杆菌稀有密码子ＡＧＧ(精氨酸 )是影响该融合基因表达的主要因素。用ＰＣＲ定位诱变法…
|
| 关 键 词： | 单链抗体 尿激酶 融合基因 连接肽 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-3061(2000)04-0514-03 |
| 修稿时间： | 1999-08-06 |
The Construction and Expression of Two Humanized scFv-urokinase Fusion Genes |
| |
| LIU Zhi-Gang,YU Wei-Yuan,WANG Xiang. The Construction and Expression of Two Humanized scFv-urokinase Fusion Genes[J]. Chinese journal of biotechnology, 2000, 16(4): 514-516 |
| |
| Authors: | LIU Zhi-Gang YU Wei-Yuan WANG Xiang |
| |
| Affiliation: | LIU Zhi-Gang,YU Wei-Yuan,WANG Xiang;(Instutute of Biotechnology, Academy of Military Medical Science,Beijing 100071) |
| |
| Abstract: | By using PCR and DNA recombination, two fusion genes of humanized mouse anti-human fibrin scFv and low molecular weight single chain urokitnase (Scu-PA-32K)was constructed. The difference of these two fusion genes lay in the linker between two moieties, one was (Ala)3 and another was (Gly4Ser)3.These two fusion genes were both overexpressed in E. Coil with the expression level at 30%. Both expression products showed the activity of binding antigen Ddimer and activating plasminogen after the denaturation and renaturation, but under general refolding conditions, the one with linker (Gly4Ser)3 showed better effect in the renaturation of fusion protein. |
| |
| Keywords: | Gene expression Scu-PA scFv fusion gene linker |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《生物工程学报》下载全文 |
