| 小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化 |
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| 引用本文： | 项丽,王申,田海山,钟美娟,周汝滨,曹定国,梁朋,张国平,何滔,庞实锋.小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化[J].中国生物工程杂志,2017,37(2):20-25. |
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| 作者姓名： | 项丽 王申 田海山 钟美娟 周汝滨 曹定国 梁朋 张国平 何滔 庞实锋 |
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| 作者单位： | 1. 广东医科大学 东莞 523808;
2. 温州医科大学药学院 温州 325035 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金（2015A030313527）、广东省省级科技计划项目（2013B031800014）、东莞市社会科技发展项目（2013108101062）、浙江省自然科学基金（LY13H080004）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆小鼠c-Myc基因,构建原核表达载体并对其进行蛋白表达及纯化。方法:以TetO-FUW-OSKM质粒为模板经PCR扩增c-Myc基因,再通过基因重组技术与pET-3C载体相连转化大肠杆菌DH5α。经抗性筛选,PCR鉴定阳性重组子,测序正确后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定分析。结果:DNA电泳结果证实PCR扩增产物与预期大小一致,DNA测序结果显示与GenBank公布的c-Myc基因序列一致,IPTG诱导SDS-PAGE电泳后,在分子量64kDa左右出现诱导后蛋白新增条带,与预测的c-Myc分子量大小一致。结论:成功地构建了pET3C-Myc原核表达载体,表达并纯化出了c-Myc蛋白,为今后研究c-Myc蛋白及相关蛋白诱导体细胞成多能干细胞打下基础。
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| 关 键 词： | c-Myc基因 基因克隆 基因表达 |
| 收稿时间： | 2016-11-04 |
Constructing Mouse pET3C-Myc Vector and Its Expression in Rosetta(DE3) and Its Purification |
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| XIANG Li,WANG Shen,TIAN Hai-shan,ZHONG Mei-juan,ZHOU Ru-bin,CAO Ding-guo,LIANG Peng,ZHANG Guo-ping,HE Tao,PANG Shi-feng.Constructing Mouse pET3C-Myc Vector and Its Expression in Rosetta(DE3) and Its Purification[J].China Biotechnology,2017,37(2):20-25. |
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| Authors: | XIANG Li WANG Shen TIAN Hai-shan ZHONG Mei-juan ZHOU Ru-bin CAO Ding-guo LIANG Peng ZHANG Guo-ping HE Tao PANG Shi-feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene clone c-Myc gene Gene expression |
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