| 过表达miR-155抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化 |
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| 引用本文： | 刘红霞,施琼,周一青,安利钦,严树涓,张汝益,翁亚光.过表达miR-155抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化[J].中国生物工程杂志,2017,37(5):9-18. |
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| 作者姓名： | 刘红霞 施琼 周一青 安利钦 严树涓 张汝益 翁亚光 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（NSFC 81672103）,国家自然科学基金（NSFC 31200971）,教育部高等学校博士点基金 （20115503110009）,重庆市渝中区科委科技项目（20130136）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究过表达miR-155对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响。方法:(1)用重组腺病毒Ad-BMP9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,定量PCR(qPCR)检测miR-155的表达,RT-PCR检测Runx2和ALP的表达。(2)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测miR-155的表达,ALP活性和染色检测早期成骨能力。(3)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,诱导分化14d茜素红S染色检测晚期成骨能力。(4)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN的表达。(5)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,Western blot检测p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达。(6)qPCR和Western blot分别检测HIF1α和VEGF的mRNA表达水平和蛋白质表达水平。(7)应用荧光素酶报告基因对miR-155的靶基因进行筛选和验证。结果:在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,过表达miR-155降低ALP活性及染色;减少钙盐沉积;成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN表达降低;抑制p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达;HIF1α和VEGF的mRNA和蛋白表达水平减少。在对靶基因的检测中,过表达miR-155可以抑制HIF1α蛋白水平的表达,但对其mRNA水平无明显影响。结论:miR-155过表达减弱BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化,可能是通过抑制Smad/BMP信号通路发挥作用,也有可能是通过抑制靶基因HIF1α的表达来发挥作用。
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| 关 键 词： | miR-155 成骨分化 骨形态发生蛋白9 HIF C3H10T1/2 |
| 收稿时间： | 2016-11-08 |
Overexpression of miR-155 Inhibits the Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells C3H10T1/2 Induced by BMP9 |
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| LIU Hong-xia,SHI Qiong,ZHOU Yi-qing,AN Li-qin,YAN Shu-juan,ZHANG Ru-yi,WENG Ya-guang.Overexpression of miR-155 Inhibits the Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells C3H10T1/2 Induced by BMP9[J].China Biotechnology,2017,37(5):9-18. |
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| Authors: | LIU Hong-xia SHI Qiong ZHOU Yi-qing AN Li-qin YAN Shu-juan ZHANG Ru-yi WENG Ya-guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-155 Bone Osteogenic differentiation morphogenetic protein 9 HIF1α C3H10T1/2 |
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