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构建转CgA基因反向cDNA片段小鼠模型
引用本文:刘晓东,孙紫清,张崇本,吴鹤龄. 构建转CgA基因反向cDNA片段小鼠模型[J]. 遗传学报, 2001, 28(6): 493-501
作者姓名:刘晓东  孙紫清  张崇本  吴鹤龄
作者单位:北京大学生命科学学院,
基金项目:国家自然科学基金资助(资助号.39470371)
摘    要:为了制作CgA基因反义RNA转基因小鼠,构建了质粒pCAS2C,并把pCAS2C中完整的反义表达框显微注射入小鼠受精卵的雌原核中,随后将注射过DNA的受精卵移植入假孕鼠的输卵管中,假母所产子一低代都用p1和p4 引物对鼠尾基因组DNA进行PCR检测,选出2只首建鼠(PCR阳性)。首建鼠与正常鼠杂交后得到F1代小鼠,经PCR方法筛选出来的阳性F1代鼠雌雄自交产生F2代。为了检测F2代鼠的基因型,将PCR方法鉴定为阳性的F2代小鼠分别与正常小鼠回交,只有回交后所得后代PCR检测结果全为阳性的F2代个体才是转基因纯合鼠,这样分别得到两只转基因首建鼠的纯合个体。转基因小鼠脑总RNA经RT-PCR反应可产生300bp的产物,证明转基因小鼠中转入的反义基因已经转录,以上结果说明转入的pCAS2C反义表达框已经整合到转基因小鼠的基因组中并遗传给后代,而且已经转录。

关 键 词:CgA基因 反义RNA 转基因小鼠 cDNA片断
文章编号:0379-4172(2001)06-0493-09
修稿时间:2001-01-18

Construction of CgA Gene Antisense Transgenic Mice
Abstract:
Keywords:CgA gene  antisense RNA  transgenic mouse
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