血红蛋白基因在产CBHⅡ毕赤酵母工程菌中的表达 |
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引用本文: | 余河斌,余少文,汤新,张煜,邢苗.血红蛋白基因在产CBHⅡ毕赤酵母工程菌中的表达[J].生物技术,2007,17(4):25-29. |
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作者姓名: | 余河斌 余少文 汤新 张煜 邢苗 |
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作者单位: | 深圳大学生命科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室,广东,深圳,518060 |
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摘 要: | 目的:提高毕赤酵母工程菌P.pastoris-CBHⅡ液体发酵产纤维二糖水解酶(CBHⅡ)的能力。方法:分别构建了用于胞外及胞内表达透明颤菌血红蛋白(VHb)基因的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA-vhb与pPICZαA(-s)-vhb。通过电转化将两种质粒转化巴氏毕赤酵母重组菌体P.pastoris-CBHⅡ菌株,经过筛选分别获得可正确表达具有生物活性的VHb蛋白的重组菌株P.pastoris-CBHⅡ-vhb(胞内表达VHb)及P.pastoris-CBHⅡ-vhb(-s)(胞外表达VHb)。结果:摇瓶发酵实验表明,血红蛋白在贫氧条件下可促进CBHⅡ的分泌表达,培养液上清的CMC酶活分别从出发菌株P.pastoris-CBHⅡ的1.81U/ml提高到2.04U/ml(胞内表达VHb)与1.93U/ml(胞外表达VHb)。VHb蛋白胞内表达菌株比胞外表达菌株效果更明显。
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关 键 词: | 纤维二糖水解酶 透明颤菌血红蛋白 胞内表达 分泌表达 毕赤酵母 |
文章编号: | 1004-311X(2007)04-0025-05 |
收稿时间: | 2007-05-16 |
修稿时间: | 2007-05-30 |
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