| 坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基基因的原核表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 左正宏, 李博文, 聂鑫怡, 王重刚, 陈奕欣. 坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基基因的原核表达与鉴定[J]. 水生生物学报, 2006, 30(3): 323-326. |
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| 作者姓名： | 左正宏 李博文 聂鑫怡 王重刚 陈奕欣 |
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| 作者单位： | 1.厦门大学生命科学学院, 厦门 361005 |
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| 基金项目： | 福建省重大农业科技项目(2001Z017),国家海洋863项目(2002AA603023)资助 |
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| 摘 要： | 通过PCR的方法从重组质粒pMD-apcAB中扩增坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基基因(apcA),并将其克隆到高效表达外源基因的原核表达质粒pTO-T7。将构建好的质粒导入表达型大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行Western-blot和质谱鉴定。结果显示:apcA全长486bp,表达的α亚基(apcA)为带有原核表达载体T7g10的12个起始氨基酸的融合蛋白,其分子量约为19.7KD。0.5mmol/L的IPTG在37℃诱导6h时,apcA的表达量达到最大,达菌体总蛋白50%以上。Western-blot和质谱鉴定的结果表明获得的融合蛋白为重组坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基。
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| 关 键 词： | 坛紫菜 别藻蓝蛋白 原核表达 Western-blot |
| 文章编号： | 1000-3207(2006)03-0323-04 |
| 收稿时间： | 2005-10-24 |
| 修稿时间： | 2006-01-13 |
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